第８期 莫蘅瑛：硫酸依替米星氯化钠注射液有关物质检测方法的对比研究 ・６７・ 硫酸依替米星氯化钠注射液有关物质检测方法的对比研究 莫蘅瑛 （海南爱科制药有限公司研发部，海南海口５７０３１１） 摘要：目的：对硫酸依替米星氯化钠注射液的有关物质进行更有效的控制。方法：新标准ＹＢＨＯ１０６２０１４采用高效液相色谱一蒸 发光散射检测法检测有关物质。原标准ＷＳ一８０７（ｘ一５９３）一２００２采用柱前衍生化ＨＰＬＣ—ｕＶ法检测有关物质，对比实验数据，分 析哪种方法能更有效地控制其有关物质。结果：通过分析实验数据．新标准比原标准更能对硫酸依替米星氯化钠注射液的有关物 质进行有效控制。结论：新标准对硫酸依替米星氯化钠注射液的质控限度更加严格，能更好的控制药品质量，保证临床疗效。 关键词：硫酸依替米星氯化钠注射液；有关物质；高效液相色谱一蒸发光散射检测法 中图分类号：Ｒ９７８．１ ２；０６５７．７ ２ 文献标识码：Ａ 文章编号：１００８—０２１Ｘ（２０１５）０８—００６７—０１ Ｃｏｍｐａｒａｔｉｖｅ Ｓｔｕｄｙ ｏｎ ｔｈｅ Ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ Ｍｅｔｈｏｄ ｏｆ Ｒｅｌａｔｅｄ Ｓｕｂｓｔａｎｃｅｓ ｉｎ Ｅｔｉｍｉｃｉｎ Ｓｕｌｆａｔｅ ａｎｄ Ｓｏｄｉｕｍ Ｃｈｌｏｒｉｄｅ Ｉｎｊｅｃｔｉｏｎ Ｍｏ Ｈｅｎｇｙｉｎｇ （Ｈａｉｎａｎ Ａｉｋｅ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｃｏ．，Ｌｔｄ．，Ｈａｉｋｏｕ ５７０３ １ １，Ｈｍｎａｎ，Ｃｈｉｎａ） Ａｂｓｔｒａｃｔ：０ｂｉｅｃｔｉｖｅ：Ｍｏｒｅ ｅｆｆｅｅｔｉｖｅ ｃｏｎｔｒｏｌ ｏｆ ｒｅｌａｔｅｄ ｓｕｂｓｔａｎｃｅｓ ｏｆ Ｅｔｉｍｉｃｉｎ Ｓｕｌｆａｔｅ ａｎｄ Ｓｏｄｉｕｍ Ｃｈｌｏｆｉｄｅ Ｉｎｉｅｅｔｉｏｎ． Ｍｅｔｈｏｄｓ：Ｔｈｅ ｎｅｗ ｓｔａｎｄａｒｄ ＹＢＨ０１０６２０１４ ｕｓｉｎｇ ＨＰＬＣ—ＥＬＳＤ ｍｅｔｈｏｄ ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ ｏｆ ｒｅｌａｔｅｄ ｓｕｂｓｔａｎｃｅｓ．ｔｈｅ ｏｌｄ ｓｔａｎｄａｒｄ ｏｆ ＷＳ一８０７（ｘ一５９３）一２００２ ｕｓｉｎｇ Ｐｒｅ—ｃｏｌｕｍｎ ｄｅｒｉｖａｔｉｚａｔｉｏｎ ＨＰＬＣ—ＵＶ ｍｅｔｈｏｄ ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ ｏｆ ｒｅｌａｔｅｄ ｓｕｂｓｔａｎｃｅｓ，ａ８ ｃｏｍｐａｒｅｄ ｗｉｔｈ ｔｈｅ ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ ｄａｔａ，ａｎａｌｙｓｉｓ ｗｈａｔ ｋｉｎｄ ｏｆ ｍｅｔｈｏｄ ｃａｎ ｍｏｒｅ ｅｆｆｅｃｔｉｖｅｌｙ ｃｏｎｔｒｏｌ ｔｈｅ ｒｅｌａｔｅｄ ｓｕｂｓｔａｎｃｅｓ．Ｒｅｓｕｌｔｓ：Ｔｈｒｏｕｇｈ ｔｈｅ ａｎａｌｙｓｉｓ ｏｆ ｔｈｅ ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ ｄａｔａ，ｔｈｅ ｎｅｗ ｓｔａｎｄａｒｄｓ ｉｓ ｍｏｒｅ ｅｆｆｅｃｔｉｖｅ ｃｏｎｔｒｏｌ ｔｈａｎ ｔｈｅ ｏｉｌ ｓｔａｎｄａｒｄ ｏｎ ｔｈｅ ｒｅｌａｔｅｄ ｓｕｂｓｔｎａｃｅｓ ｏｆ Ｅｔｉｍｉｃｉｎ Ｓｕｌｆａｔｅ ａｎｄ Ｓｏｄｉｕｍ Ｃｈｌｏｒｉｄｅ Ｉｎｉｅｃｔｉｏｎ．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ：Ｔｈｅ ｒｅｌａｔｅｄ ｓｕｂｓｔａｎｃｅ ｏｆ ｎｅｗ ｓｔａｎｄａｒｄ ｂｙ Ｅｔｉｍｉｃｉｎ Ｓｕｌｆａｔｅ ａｎｄ Ｓｏｄｉｕｍ Ｃｈｌｏｒｉｄｅ Ｉｎｊｅｃｔｉｏｎ ｗａｓ ｍｏｒｅ ｓｔｉｒｃｔ ｃｏｎｔｒｏｌ，ｂｅｔｔｅｒ ｃｏｎｔｒｏｌ ｏｆ ｐｒｏｄｕｃｔ ｑｕａｌｌｔｙ ａｎｄ ｅｎｓｕｒｅ ｃｌｉｎｉｃａｌ ｅｆｆｉｃａｃｙ． Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ：ｅｔｉｍｉｅｉｎ ｓｕｌｆａｔｅ ａｎｄ ｓｏｄｉｕｍ ｃｈｌｏｒｉｄｅ ｉａｊｅｃｔｉｏｎ；ｒｅｌａｔｅｄ ｓｕｂｓｔａｎｃｅｓ；ＨＰＬＣ—ＥＬＳＤ 硫酸依替米星氯化钠注射液是我国唯一具有自主知识 一１０Ａ ｖｐ紫外检测器（岛津）。 产权的抗生素一类新药，是江苏省微生物研究所自行研制发 ２试剂 明的新一代半合成氨基糖苷类抗生索，其作用机制是抑制敏 硫酸依替米星氯化钠注射液（１００ｍｌ：０．３ｇ）三批长期２４ 感菌的蛋白质合成，具有抗菌谱广、抗菌活性高、不良反应发 个月样品１２０２０１、１２０２０２、１２０２０３为自制品。依替米星对照 生率低、交叉耐药性较少、应用广泛等优势。 品、杂质Ａ对照品、西索米星对照品、庆大霉素Ｃｌａ对照品、 我公司硫酸依替米星氯化钠注射液执行的原标准为中 小诺霉素对照品、奈替米星对照品、杂质Ｂ对照品。 华人民卫生部标准（试行）ＷＳ一８０７（ｘ一５９３）一２００２，原标准 ３实验与结果 中仅设置了控制依替米星纯度的项目，并没有进行严格的有 关物质检查，使用柱前衍生化的高效液相色谱一紫外检测器 ３．１ 色谱条件 新标准：１２００型高效液相色谱仪（安捷伦），Ｇ４２６０Ｂ型 法，以面积归一化法计算依替米星的纯度，而在衍生化过程 蒸发光检测器（安捷伦），Ｇｅｍｉｎｉ—ＮＸ ５ｕ Ｃ１８柱（菲罗门）， 中，容易引入杂质或干扰峰，准确性较差，而且标准对纯度限 度控制较低。因此，国家药典委员会对其提高标准为国家药 填充剂为十八烷基硅烷键合硅胶（ｐＨ值：０．８—８．０），流动相 为０．２ｍｏｌ／Ｌ三氟醋酸一甲醇（９Ｏ：ｌ０），流速为０．５ｍ［Ｖｍｉｎ， 品标准ＹＢＨ０１０６２０１４，采用高效液相色谱一蒸发光散射检测 法对其有关物质进行控制，使主峰与各杂质峰得到良好分 进样量为８０￣Ｌ；蒸发光散射检测器检测：漂移管温度６０￣Ｃ， 离，方法简单易行、灵敏度高、专属性好、耐用性好，不仅对单 载气流速为１．８Ｌ／ｍｉｎ。 个杂质进行定性，而且严格控制每个已知杂质的含量…。 原标准：ＬＣ一１０ＡＴ ｖｐ高效液相色谱仪（岛津），ＳＰＤ一 １０Ａ ｖｐ紫外检测器（岛津），Ｌｕｎａ ５ｕ Ｃ１８柱（菲罗门），填充 ｌ 仪器 剂为十八烷基硅烷键合硅胶，流动相为水一冰醋酸一甲醇混 １２００型高效液相色谱仪（安捷伦），ＣＡ２６０Ｂ型蒸发光检 （下转第７２页） 测器（安捷伦），ＬＣ—ＩＯＡＴ ｖｐ高效液相色谱仪（岛津），ＳＰＤ 收稿日期：２０１５—０１—２１ 作者简介：莫蘅瑛（１９８７一），女，海南省海口市人，助理工程师，本科。 ・７２・ 山东化工 ＳＨＡＮＤ０ＮＧ ＣＨＥＭＩＣＡＬ ＩＮＤＵＳＴＲＹ ２０１５年第４４卷 济效益相当可观。因此，认真分析生产过程中介耗产生的原 因，探讨降低介耗的具体方法与措施，对指导生产及综合效 益的提高具有重要意义。 ［Ｊ］．煤，２００８，１７（１Ｏ）：８９—９１． ［４］齐桂素，李利娟，靳涛，等．赵固一矿选煤厂降低重介质 消耗的实践［Ｊ］．选煤技术，２０１１（４）：２９—３１． ［５］李彪．重介质选煤厂降低介耗的探讨［Ｊ］．现代矿业， ２００９，２５（３）：１０９—１１１． 参考文献 ［１］徐卯聪．二矿选煤厂降低重介质消耗的有效途径［Ｊ］．中 国矿山工程，２００８，３７（６）：２ｌ一２４． ［２］谢广元．选矿学［Ｍ］．徐州：中国矿业大学出版社，２００１． （本文文献格式：刘文秋．吕家坨矿选煤厂降低重介质消耗的 探讨［Ｊ］．山东化工。２０１５，４４（８）：７０—７２．） 业 ｊ － ｊ 夸 夸 业 ｒ ｊｋ， 卓・－｝ 业坐ｊ 夸 ； 夸ｋ夸 ［３］刘俊平．降低重介质选煤过程中介质消耗的探讨与实践 夸 夸ｋ 夸ｋ 窜 －ｊ －ｊ －・：ｊ 搴ｋ ｋ ｒ，搴薯ｔ 业业业！ ｌｔｒ ｋ—ｊｋｒ夸ｋ （上接第６７页） 合溶液（２０：５：７５）配制的０．０２ｍｏｌ／Ｌ庚烷磺酸钠溶液，检测 波长为３３０ｎｍ，进样量为２Ｏ Ｌ。 ３．２溶液的制备 新标准：精密量取本公司生产的硫酸依替米星氯化钠注 射液样品适量，加流动相定量稀释制成每ｌｍｌ中含依替米星 ０．５ｍｇ的溶液，作为供试品溶液；精密称取依替米星对照品 适量，加流动相溶解并稀释制成每ｌｍＬ中含依替米星０．５ｍｇ 的溶液，精密量取溶液各适量，分别用流动相定量稀释制成 每ｌｍＬ中含依替米星５峭、１０ 、２５ ｇ的溶液，作为对照品 溶液（１）、（２）、（３）。 原标准：精密量取本公司生产的硫酸依替米星氯化钠注 射液样品适量，加水稀释制成每１ｍＬ中含０．５ｒａｇ的溶液，另 取依替米星标准品和庆大霉素Ｃ１ａ对照品适量，加水制成每 １ｍＬ中各含０．５ｍｇ的混合溶液，取上述两种溶液各４ｍＬ，分 别置于１０ｍＬ的量瓶中，各加入异丙醇２ｍＬ和邻苯二醛试液 １．０ｍＬ，并用异丙醇稀释至刻度，摇匀，置６０￣Ｃ水浴中加热 １５ｒａｉｎ，冷却至室温，滤过，取续滤液分别作为供试品溶液和 预试溶液。 ３．３有关物质检测（新标准） 精密量取８０ 的对照品溶液（１），注入高效液相色谱 仪，调节检测灵敏度，将主成分的色谱峰峰高调为满量程的 ２５％，精密量取各８Ｏ 的对照品溶液（１）、（２）、（３），分别注 入高效液相色谱仪，记录色谱图，用对照品溶液浓度的对数 值和相应峰面积的对数值来计算线性回归方程，相关系数 （ｒ）应不小于０．９９；另取供试品溶液，同法测定，记录色谱图 至主成分峰保留时间的２倍，供试品溶液的色谱图中如有杂 质峰，除硫酸根与氯化钠峰（杂质Ａ峰之前的峰）外，用线性 回归方程来计算，杂质Ａ、西索米星、小诺霉素、奈替米星分 别不得超过２．Ｏ％，庆大霉素Ｃｌａ、杂质Ｂ（与主峰相对保留 时问约为１．４倍）分别不得超过３．Ｏ％，其他单个杂质不得超 过０．２％，总杂质不得超过６．０％。在供试品溶液的色谱图 中，任何小于对照品溶液（１）主峰面积０．０２倍的峰可忽略不 计。检测结果如下表１。 ３．４有关物质的检测（原标准） 精密量取２０ 的预试溶液，注入高效液相色谱仪，依替 米星主峰与庆大霉素Ｃ。。主峰的分离度应符合要求，理论板 数按依替米星主峰计算应不低于２０００。精密量取２０ 的 供试品溶液，注入高效液相色谱仪，记录色谱图至主峰保留 时间的２倍，用峰面积归一化法计算，含依替米星的纯度不 得少于８８．Ｏ％。 检测结果如下： 批号１２０２０１的样品，依替米星纯度为８９．３％； 批号１２０２０２的样品，依替米星纯度为８９．５％； 批号１２０２０３的样品，依替米星纯度为８９．１％。 表１检测结果 ％ ４结论 本公司生产的三批硫酸依替米星氯化钠注射液，采用原 标准检测有关物质时，仅设置了控制依替米星纯度的项目， 并没有进行严格的有关物质检查，使用柱前衍生化的高效液 相色谱一紫外检测器法，以面积归一化法计算依替米星的纯 度，而从实验数据中可以看出，原标准对于纯度限度的控制 较低，仅要求控制纯度不小于８８．Ｏ％。 采用新标准检测有关物质时，采用高效液相色谱一蒸发 光散射检测法，而从实验数据可以看出，新标准不仅对单个 杂质进行定性（杂质Ａ、西索米星、小诺霉素、奈替米星、庆大 霉素ｃ 杂质Ｂ），而且严格控制每个已知杂质的含量（杂质 Ａ、西索米星、小诺霉素、奈替米星分别不得过２．Ｏ％，庆大霉 素Ｃ 杂质Ｂ分别不得过３．０％，其他单个杂质不得过０． ２％，杂质总量不得过６．Ｏ％）。通过对上述实验数据的对比 研究，新标准对硫酸依替米星氯化钠注射液的质控限度更加 严格，能更好的控制药品质量，保证临床疗效。 参考文献 ［１］赵卫，袁耀佐，芦丽，等．ＨＰＬＣ—ＥＬＳＤ法测定硫酸 依替米星氯化钠注射液有关物质［Ｊ］．药学研究，２０１３， ３２（１１）：６３４—６３７． （本文文献格式：莫蘅瑛．硫酸依替米星氯化钠注射液有关物 质检测方法的对比研究［Ｊ］．山东化工，２０１５，４４（８）：６７，７２．）
