一种2-氨基2,3二甲基丁酰胺的制备方法[发明专利]

(12)发明专利申请

(10)申请公布号 CN 112342252 A(43)申请公布日 2021.02.09

(21)申请号 202011237395.9(22)申请日 2020.11.09

(71)申请人 唐山晋广化工有限公司

地址 063000 河北省唐山市南堡开发区荣

业道南侧、化工路东侧(72)发明人 夏爱艳　

(74)专利代理机构 石家庄领皓专利代理有限公

司 13130

代理人 姬学森(51)Int.Cl.

C12P 13/02(2006.01)C12N 1/21(2006.01)C12N 15/70(2006.01)C12N 15/66(2006.01)C12N 9/88(2006.01)

权利要求书1页 说明书8页

C12R 1/19(2006.01)

CN 112342252 A()发明名称

一种2-氨基2，3二甲基丁酰胺的制备方法(57)摘要

本发明涉及2‑氨基2，3二甲基丁酰胺制备技术领域，尤其涉及一种2‑氨基2，3二甲基丁酰胺的制备方法，包括以下步骤：S1、菌株的筛选：对大肠杆菌重组腈水合酶酶库进行筛选，获得来源于Pseudonocardia thermophila JCM3095的大肠杆菌重组菌；S2、新菌株的获取：以pET‑28a为载体，通过镍柱对大肠杆菌重组菌进行纯化，纯化时加入0.2mM金属离子和0.8mL有机溶剂，以获得新菌株；S3、发酵条件优化：令新菌株在30‑40℃下生长至OD600为0.8‑1.0时，向其中添加诱导剂。本发明在制备过程中，加入金属离子和有机溶剂，能够对腈水合酶的活力存在一定的影响，既能进一步提高其在中性偏酸的条件下的稳定性，又能改善碱性环境下对酶的抑制作用。

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权　利　要　求　书

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1.一种2-氨基2，3二甲基丁酰胺的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：S1、菌株的筛选：对大肠杆菌重组腈水合酶酶库进行筛选，获得来源于Pseudonocardia thermophila JCM3095的大肠杆菌重组菌；

S2、新菌株的获取：以pET-28a为载体，通过镍柱对大肠杆菌重组菌进行纯化，纯化时加入0.2mM金属离子和0.8mL有机溶剂，以获得新菌株；

S3、发酵条件优化：令新菌株在30-40℃下生长至OD600为0.8-1.0时，向其中添加诱导剂，令其在发酵培养基内进行发酵24-48h以获得腈水合酶，在培养过程中，间隔补加1％(w/v)鲜骨蛋白胨；

S4、反应体系的构建：以2-氨基-2,3-二甲基丁腈为底物，腈水合酶作为催化剂，在HFE-7100/水(10％，v/v)两相体系下，于pH6.0-10.0、20-40℃环境下进行催化水合反应，制得2-氨基-2,3-二甲基丁酰胺。

2.根据权利要求1所述的一种2-氨基2，3二甲基丁酰胺的制备方法，其特征在于，所述菌株的筛选过程采用的是铁离子显色反应，其中，铁离子显色反应的标准为颜色呈深紫色且带有金属光泽。

3.根据权利要求1所述的一种2-氨基2，3二甲基丁酰胺的制备方法，其特征在于，所述金属离子为Ni2+、K+和Ca2+中的任意一种，有机溶剂为异辛烷、醋酸甲酯和乙二醇单甲醚的其中一种。

4.根据权利要求1所述的一种2-氨基2，3二甲基丁酰胺的制备方法，其特征在于，所述载体与大肠杆菌重组菌的结合过程如下：先利用EcoRI和HindIII酶切割位点，然后进行蛋白诱导表达，将切割下的质粒与基因用DNA连接酶连接成重组质粒，最后与大肠杆菌重组菌的感受态细胞混合。

5.根据权利要求1所述的一种2-氨基2，3二甲基丁酰胺的制备方法，其特征在于，所述诱导剂为0.1mM IPTG，诱导温度为20℃。

6.根据权利要求1所述的一种2-氨基2，3二甲基丁酰胺的制备方法，其特征在于，所述发酵培养基组分为1.6％(w/v)山梨醇、2％(w/v)鲜骨蛋白胨、1％(w/v)Oxoid酵母提取物和0.25％(w/v)Na2HPO4。

7.根据权利要求1所述的一种2-氨基2，3二甲基丁酰胺的制备方法，其特征在于，所述新菌株为大肠杆菌重组菌中的E.coli BL21(DE3)/pET-28a(+)NHase。

8.根据权利要求1所述的一种2-氨基2，3二甲基丁酰胺的制备方法，其特征在于，所述S3中补加鲜骨蛋白胨的起始时间为第4个小时，且补加的时间间隔为4h。

9.根据权利要求1所述的一种2-氨基2，3二甲基丁酰胺的制备方法，其特征在于，所述2-氨基-2,3-二甲基丁腈的初始浓度为0.03-0.3M，且在S4中，2-氨基-2,3-二甲基丁腈和腈水合酶的配比为(1.1-1.3)：1。

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一种2-氨基2，3二甲基丁酰胺的制备方法

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技术领域

[0001]本发明涉及2-氨基2，3二甲基丁酰胺制备技术领域，尤其涉及一种2-氨基2，3二甲基丁酰胺的制备方法。

背景技术

[0002]2-氨基-2,3-二甲基丁酰胺，外观为白色片状晶体，熔点为84℃，能溶于水和大多数有机溶剂。是咪唑啉酮类超高效除草剂如咪唑乙烟酸、咪唑喹啉酸和甲氧咪草烟等的通用中间体，市场需求广阔。但是至制备2-氨基-2,3-二甲基丁酰胺的过程中，其中所含的腈水合酶在中性偏酸的条件下，稳定性较好，而其碱性环境会对该酶的酶活造成严重的抑制，影响2-氨基-2,3-二甲基丁酰胺的被吸收反应效果。因此，我们提出了一种2-氨基2，3二甲基丁酰胺的制备方法用于解决上述问题。

发明内容

[0003]本发明的目的是为了解决现有技术中存在的缺点，而提出的一种2-氨基2，3二甲基丁酰胺的制备方法。[0004]一种2-氨基2，3二甲基丁酰胺的制备方法，包括以下步骤：[0005]S1、菌株的筛选：对大肠杆菌重组腈水合酶酶库进行筛选，获得来源于Pseudonocardia thermophila JCM3095的大肠杆菌重组菌；[0006]S2、新菌株的获取：以pET-28a为载体，通过镍柱对大肠杆菌重组菌进行纯化，纯化时加入0.2mM金属离子和0.8mL有机溶剂，以获得新菌株；[0007]S3、发酵条件优化：令新菌株在30-40℃下生长至OD600为0.8-1.0时，向其中添加诱导剂，令其在发酵培养基内进行发酵24-48h以获得腈水合酶，在培养过程中，间隔补加1％(w/v)鲜骨蛋白胨；[0008]S4、反应体系的构建：以2-氨基-2,3-二甲基丁腈为底物，腈水合酶作为催化剂，在HFE-7100/水(10％，v/v)两相体系下，于pH6.0-10.0、20-40℃环境下进行催化水合反应，制得2-氨基-2,3-二甲基丁酰胺。[0009]优选的，所述菌株的筛选过程采用的是铁离子显色反应，其中，铁离子显色反应的标准为颜色呈深紫色且带有金属光泽。[0010]优选的，所述金属离子为Ni2+、K+和Ca2+中的任意一种，有机溶剂为异辛烷、醋酸甲酯和乙二醇单甲醚的其中一种。[0011]优选的，所述载体与大肠杆菌重组菌的结合过程如下：先利用EcoRI和HindIII酶切割位点，然后进行蛋白诱导表达，将切割下的质粒与基因用DNA连接酶连接成重组质粒，最后与大肠杆菌重组菌的感受态细胞混合。[0012]优选的，所述诱导剂为0.1mM IPTG，诱导温度为20℃。[0013]优选的，所述发酵培养基组分为1.6％(w/v)山梨醇、2％(w/v)鲜骨蛋白胨、1％(w/v)Oxoid酵母提取物和0.25％(w/v)Na2HPO4。

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优选的，所述新菌株为大肠杆菌重组菌中的E.coli BL21(DE3)/pET-28a(+)优选的，所述S3中补加鲜骨蛋白胨的起始时间为第4个小时，且补加的时间间隔为

NHase。

[0015]

4h。

[0016]

优选的，所述2-氨基-2,3-二甲基丁腈的初始浓度为0.03-0.3M，且在S4中，2-氨

基-2,3-二甲基丁腈和腈水合酶的配比为(1.1-1.3)：1。[0017]本发明的有益效果是：[0018]1、本发明在制备过程中，向其中添加金属离子，其可以维持多相体系的渗透平衡，且在添加的过程中，发现在加入了Ni2+后，经发酵后，腈水合酶的活性提幅都高于其他金属离子。

[0019]2、本发明在制备过程中，向其中添加有机溶剂，其可以改善腈水合酶的稳定性，且在添加的过程中，发现在加入量异辛烷后，经发酵后，其对腈水合酶活性的促进作用都优于其他有机溶剂的效果。[0020]综上所述，本发明在制备过程中，加入金属离子和有机溶剂，能够对腈水合酶的活力存在一定的影响，既能进一步提高其在中性偏酸的条件下的稳定性，又能改善碱性环境下对酶的抑制作用。

具体实施方式

[0021]下面结合具体实施例对本发明作进一步解说。[0022]一种2-氨基2，3二甲基丁酰胺的制备方法，包括以下步骤：[0023]S1、菌株的筛选：对大肠杆菌重组腈水合酶酶库进行筛选，通过铁离子显色反应，获得来源于Pseudonocardia thermophila JCM3095的大肠杆菌重组菌；[0024]S2、新菌株的获取：以pET-28a为载体，通过镍柱对大肠杆菌重组菌进行纯化，纯化时加入0.2mM金属离子和0.8mL有机溶剂，以获得新菌株，其中金属离子为Ni2+、K+和Ca2+中的任意一种，有机溶剂为异辛烷、醋酸甲酯和乙二醇单甲醚的其中一种，在将载体与大肠杆菌重组菌结合时，先利用EcoRI和HindIII酶切割位点，然后进行蛋白诱导表达，将切割下的质粒与基因用DNA连接酶连接成重组质粒，最后与大肠杆菌重组菌的感受态细胞混合；[0025]S3、发酵条件优化：令新菌株在37℃下生长至OD600为0.8时，向其中添加诱导剂0.1mM IPTG，在20℃环境下进行诱导，令其在发酵培养基内进行发酵24h以获得腈水合酶，在培养过程中，从第4个小时开始，每隔4h向其中补加1％(w/v)鲜骨蛋白胨；[0026]S4、反应体系的构建：以2-氨基-2,3-二甲基丁腈为底物，腈水合酶作为催化剂，并令其二者以1.3:1的配比在HFE-7100/水(10％，v/v)两相体系下，于pH6.0、35℃环境下进行催化水合反应，制得2-氨基-2,3-二甲基丁酰胺。[0027]其中，发酵培养基组分为1.6％(w/v)山梨醇、2％(w/v)鲜骨蛋白胨、1％(w/v)Oxoid酵母提取物和0.25％(w/v)Na2HPO4；2-氨基-2,3-二甲基丁腈的初始浓度为0.3M。[0028]实施例一：[0029]一种2-氨基2，3二甲基丁酰胺的制备方法，包括以下步骤：[0030]S1、菌株的筛选：对大肠杆菌重组腈水合酶酶库进行筛选，通过铁离子显色反应，获得来源于Pseudonocardia thermophila JCM3095的大肠杆菌重组菌；

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S2、新菌株的获取：以pET-28a为载体，通过镍柱对大肠杆菌重组菌进行纯化，纯化

时加入0.2mM金属离子和0.8mL有机溶剂，以获得新菌株；[0032]S3、发酵条件优化：令新菌株在37℃下生长至OD600为0.8时，向其中添加诱导剂0.1mM IPTG，在20℃环境下进行诱导，令其在发酵培养基内进行发酵24h以获得腈水合酶，在培养过程中，从第4个小时开始，每隔4h向其中补加1％(w/v)鲜骨蛋白胨；[0033]S4、反应体系的构建：以2-氨基-2,3-二甲基丁腈为底物，腈水合酶作为催化剂，并令其二者以1.3:1的配比在HFE-7100/水(10％，v/v)两相体系下，于pH6.0、35℃环境下进行催化水合反应，制得2-氨基-2,3-二甲基丁酰胺。[0034]实施例二：[0035]一种2-氨基2，3二甲基丁酰胺的制备方法，包括以下步骤：[0036]S1、菌株的筛选：对大肠杆菌重组腈水合酶酶库进行筛选，通过铁离子显色反应，获得来源于Pseudonocardia thermophila JCM3095的大肠杆菌重组菌；[0037]S2、新菌株的获取：以pET-28a为载体，通过镍柱对大肠杆菌重组菌进行纯化，纯化时加入0.2mM金属离子和0.8mL有机溶剂，以获得新菌株；[0038]S3、发酵条件优化：令新菌株在37℃下生长至OD600为0.8时，向其中添加诱导剂0.1mM IPTG，在20℃环境下进行诱导，令其在发酵培养基内进行发酵24h以获得腈水合酶，在培养过程中，从第4个小时开始，每隔4h向其中补加1％(w/v)鲜骨蛋白胨；[0039]S4、反应体系的构建：以2-氨基-2,3-二甲基丁腈为底物，腈水合酶作为催化剂，并令其二者以1.3:1的配比在HFE-7100/水(10％，v/v)两相体系下，于pH8.0、35℃环境下进行催化水合反应，制得2-氨基-2,3-二甲基丁酰胺。[0040]对比例一-对比例三：[0041]一种2-氨基2，3二甲基丁酰胺的制备方法，包括以下步骤：[0042]S1、菌株的筛选：对大肠杆菌重组腈水合酶酶库进行筛选，通过铁离子显色反应，获得来源于Pseudonocardia thermophila JCM3095的大肠杆菌重组菌；[0043]S2、新菌株的获取：以pET-28a为载体，通过镍柱对大肠杆菌重组菌进行纯化，纯化时加入0.2mM金属离子，以获得新菌株；[0044]S3、发酵条件优化：令新菌株在37℃下生长至OD600为0.8时，向其中添加诱导剂0.1mM IPTG，在20℃环境下进行诱导，令其在发酵培养基内进行发酵24h以获得腈水合酶，在培养过程中，从第4个小时开始，每隔4h向其中补加1％(w/v)鲜骨蛋白胨；[0045]S4、反应体系的构建：以2-氨基-2,3-二甲基丁腈为底物，腈水合酶作为催化剂，并令其二者以1.3:1的配比在HFE-7100/水(10％，v/v)两相体系下，于35℃且为酸性的环境下进行催化水合反应，制得2-氨基-2,3-二甲基丁酰胺。[0046]对比例四-对比例六：[0047]一种2-氨基2，3二甲基丁酰胺的制备方法，包括以下步骤：[0048]S1、菌株的筛选：对大肠杆菌重组腈水合酶酶库进行筛选，通过铁离子显色反应，获得来源于Pseudonocardia thermophila JCM3095的大肠杆菌重组菌；[0049]S2、新菌株的获取：以pET-28a为载体，通过镍柱对大肠杆菌重组菌进行纯化，纯化时加入0.2mM金属离子，以获得新菌株；[0050]S3、发酵条件优化：令新菌株在37℃下生长至OD600为0.8时，向其中添加诱导剂

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0.1mM IPTG，在20℃环境下进行诱导，令其在发酵培养基内进行发酵24h以获得腈水合酶，在培养过程中，从第4个小时开始，每隔4h向其中补加1％(w/v)鲜骨蛋白胨；[0051]S4、反应体系的构建：以2-氨基-2,3-二甲基丁腈为底物，腈水合酶作为催化剂，并令其二者以1.3:1的配比在HFE-7100/水(10％，v/v)两相体系下，于35℃且为碱性的环境下进行催化水合反应，制得2-氨基-2,3-二甲基丁酰胺。[0052]于对比例一-对比例六中，分别加入三种金属离子(Ni2+、K+和Ca2+)，检测发酵后腈水合酶的酶活，另外，再取湿菌体(小球诺卡氏菌)3.0g悬浮于180ml pH 7.8的磷酸盐缓冲液中，在30℃、转速180rpm的条件下预热5min，加入2-氨基-2,3-二甲基丁酰胺，使其终浓度达到0.2M，反应40min，取样气相测定上述反应40min后的反应溶液每100mL中2-氨基-2,3-二甲基丁酰胺的浓度(即2-氨基-2,3-二甲基丁酰胺此时的占比率，占比率高则说明2-氨基-2,3-二甲基丁酰胺仍有大量未被吸收反应，吸收反应率低，反之则说明2-氨基-2,3-二甲基丁酰胺吸收反应率高)，具体数据如下表所示(表中“√”表示加入，“×”表示未加入)：

[0053]

注：占比率为100mL的反应后溶液中2-氨基-2,3-二甲基丁酰胺所占的百分比。[0055]由上表数据可知，向菌株中添加金属离子(Ni2+、K+或Ca2+)，都可以维持多相体系的渗透平衡，且在添加的过程中，可以发现在加入了Ni2+后，发酵后腈水合酶的活性的增幅都高于其他金属离子，另外，在同样的条件下，加入了Ni2+改性后的2-氨基-2,3-二甲基丁酰胺在反应容液中的占比率相对较低，也就是说，该情况下的2-氨基-2,3-二甲基丁酰胺更易被吸收反应。

[0056]对比例七-对比例九：[0057]一种2-氨基2，3二甲基丁酰胺的制备方法，包括以下步骤：[0058]S1、菌株的筛选：对大肠杆菌重组腈水合酶酶库进行筛选，通过铁离子显色反应，获得来源于Pseudonocardia thermophila JCM3095的大肠杆菌重组菌；[0059]S2、新菌株的获取：以pET-28a为载体，通过镍柱对大肠杆菌重组菌进行纯化，纯化时加入0.8mL有机溶剂，以获得新菌株；

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S3、发酵条件优化：令新菌株在37℃下生长至OD600为0.8时，向其中添加诱导剂

0.1mM IPTG，在20℃环境下进行诱导，令其在发酵培养基内进行发酵24h以获得腈水合酶，在培养过程中，从第4个小时开始，每隔4h向其中补加1％(w/v)鲜骨蛋白胨；[0061]S4、反应体系的构建：以2-氨基-2,3-二甲基丁腈为底物，腈水合酶作为催化剂，并令其二者以1.3:1的配比在HFE-7100/水(10％，v/v)两相体系下，于35℃且为酸性的环境下进行催化水合反应，制得2-氨基-2,3-二甲基丁酰胺。[0062]对比例十-对比例十二：[0063]一种2-氨基2，3二甲基丁酰胺的制备方法，包括以下步骤：[00]S1、菌株的筛选：对大肠杆菌重组腈水合酶酶库进行筛选，通过铁离子显色反应，获得来源于Pseudonocardia thermophila JCM3095的大肠杆菌重组菌；[0065]S2、新菌株的获取：以pET-28a为载体，通过镍柱对大肠杆菌重组菌进行纯化，纯化时加入0.8mL有机溶剂，以获得新菌株；[0066]S3、发酵条件优化：令新菌株在37℃下生长至OD600为0.8时，向其中添加诱导剂0.1mM IPTG，在20℃环境下进行诱导，令其在发酵培养基内进行发酵24h以获得腈水合酶，在培养过程中，从第4个小时开始，每隔4h向其中补加1％(w/v)鲜骨蛋白胨；[0067]S4、反应体系的构建：以2-氨基-2,3-二甲基丁腈为底物，腈水合酶作为催化剂，并令其二者以1.3:1的配比在HFE-7100/水(10％，v/v)两相体系下，于35℃且为碱性的环境下进行催化水合反应，制得2-氨基-2,3-二甲基丁酰胺。[0068]对比例七-对比例十二中，分别加入三种有机溶剂(异辛烷、醋酸甲酯或乙二醇单甲醚)，检测发酵后腈水合酶的酶活，另外，再取湿菌体(小球诺卡氏菌)3.0g悬浮于180ml pH 7.8的磷酸盐缓冲液中，在30℃、转速180rpm的条件下预热5min，加入2-氨基-2,3-二甲基丁酰胺，使其终浓度达到0.2M，反应40min，取样气相测定上述反应40min后的反应溶液每100mL中2-氨基-2,3-二甲基丁酰胺的浓度(即2-氨基-2,3-二甲基丁酰胺此时的占比率，占比率高则说明2-氨基-2,3-二甲基丁酰胺仍有大量未被吸收反应，吸收反应率低，反之则说明2-氨基-2,3-二甲基丁酰胺吸收反应率高)，具体数据如下表所示(表中“√”表示加入，“×”表示未加入)：

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[0070]

注：占比率为100mL的反应后溶液中2-氨基-2,3-二甲基丁酰胺所占的百分比。

[0072]由上表数据可知，向菌株中添加有机溶剂(异辛烷、醋酸甲酯或乙二醇单甲醚)，可以改善腈水合酶的稳定性，且在添加的过程中，发现在加入异辛烷后，经发酵后，其对腈水合酶活性的促进作用都优于其他有机溶剂的效果，另外，在同样的条件下，加入了异辛烷改性后的2-氨基-2,3-二甲基丁酰胺在反应溶液中的占比率相对较低，也就是说，该情况下的2-氨基-2,3-二甲基丁酰胺更易被吸收反应。[0073]参照例一：[0074]一种2-氨基2，3二甲基丁酰胺的制备方法，包括以下步骤：[0075]S1、菌株的筛选：对大肠杆菌重组腈水合酶酶库进行筛选，通过铁离子显色反应，获得来源于Pseudonocardia thermophila JCM3095的大肠杆菌重组菌；[0076]S2、新菌株的获取：以pET-28a为载体，通过镍柱对大肠杆菌重组菌进行纯化，以获得新菌株；[0077]S3、发酵条件优化：令新菌株在37℃下生长至OD600为0.8时，向其中添加诱导剂0.1mM IPTG，在20℃环境下进行诱导，令其在发酵培养基内进行发酵24h以获得腈水合酶，在培养过程中，从第4个小时开始，每隔4h向其中补加1％(w/v)鲜骨蛋白胨；[0078]S4、反应体系的构建：以2-氨基-2,3-二甲基丁腈为底物，腈水合酶作为催化剂，并令其二者以1.3:1的配比在HFE-7100/水(10％，v/v)两相体系下，于pH6.0、35℃环境下进行

[0071]

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催化水合反应，制得2-氨基-2,3-二甲基丁酰胺。[0079]参照例二：[0080]S1、菌株的筛选：对大肠杆菌重组腈水合酶酶库进行筛选，通过铁离子显色反应，获得来源于Pseudonocardia thermophila JCM3095的大肠杆菌重组菌；[0081]S2、新菌株的获取：以pET-28a为载体，通过镍柱对大肠杆菌重组菌进行纯化，以获得新菌株；[0082]S3、发酵条件优化：令新菌株在37℃下生长至OD600为0.8时，向其中添加诱导剂0.1mM IPTG，在20℃环境下进行诱导，令其在发酵培养基内进行发酵24h以获得腈水合酶，在培养过程中，从第4个小时开始，每隔4h向其中补加1％(w/v)鲜骨蛋白胨；[0083]S4、反应体系的构建：以2-氨基-2,3-二甲基丁腈为底物，腈水合酶作为催化剂，并令其二者以1.3:1的配比在HFE-7100/水(10％，v/v)两相体系下，于pH8.0、35℃环境下进行催化水合反应，制得2-氨基-2,3-二甲基丁酰胺。

[0084]将对比例一和七与实施例一以及参照例一对比成组，并将对比例四和十与实施例二及参照例二对比成组，对其中的腈水合酶进行酶活检测，另外，再取湿菌体(小球诺卡氏菌)3.0g悬浮于180ml pH 7.8的磷酸盐缓冲液中，在30℃、转速180rpm的条件下预热5min，加入2-氨基-2,3-二甲基丁酰胺，使其终浓度达到0.2M，反应40min，取样气相测定上述反应40min后的反应溶液每100mL中2-氨基-2,3-二甲基丁酰胺的浓度(即2-氨基-2,3-二甲基丁酰胺此时的占比率，占比率高则说明2-氨基-2,3-二甲基丁酰胺仍有大量未被吸收反应，吸收反应率低，反之则说明2-氨基-2,3-二甲基丁酰胺吸收反应率高)，具体数据如下表所示(表中“√”表示加入，“×”表示未加入)：

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说　明　书

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注：占比率为100mL的反应后溶液中2-氨基-2,3-二甲基丁酰胺所占的百分比。

[0087]由上表可知，在菌株中加入金属离子或有机溶剂后，对经发酵后所产生的腈水合酶的活性都具有一定的促进作用，且同时加入金属离子和有机溶剂后，能够进一步的提高腈水合酶的活性，另外，在同样的条件下，仅加入金属离子或有机溶剂改性后的2-氨基-2,3-二甲基丁酰胺在反应溶液中的占比率达20％-30％，而同时加入金属离子和有机溶剂改性后的2-氨基-2,3-二甲基丁酰胺在反应溶液中的占比率低于20％，能够大幅度提高2-氨基-2,3-二甲基丁酰胺的占比率，也就是说，该情况下的2-氨基-2,3-二甲基丁酰胺更易被吸收反应。

[0088]以上所述，仅为本发明较佳的具体实施方式，但本发明的保护范围并不局限于此，任何熟悉本技术领域的技术人员在本发明揭露的技术范围内，根据本发明的技术方案及其发明构思加以等同替换或改变，都应涵盖在本发明的保护范围之内。

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