第８期（总第２８９期） ２０１２年８月 农产品加工・学刊 Ａｃａｄｅｍｉｃ Ｐｅｒｉｏｄｉｃａｌ ｏｆ Ｆａｒｍ Ｐｒｏｄｕｃｔｓ Ｐｒｏｃｅｓｓｉｎｇ Ｎｏ．８ Ａｕｇ． 文章编号：１６７１—９６４６（２０１２）０８—００５５—０３ 酶法提取枸杞多糖及脱色方法研究 邹东恢，李国全 （齐齐哈尔大学食品学院农产品加工重点实验室，黑龙江齐齐哈尔１６１００６） 摘要：研究了酶法提取枸杞多糖及脱色工艺方法。采用纤维素酶、木瓜蛋白酶复合处理提取枸杞多糖，采用正交试 验确定最佳脱色工艺条件为：活性炭用量２％，脱色温度３０℃，酶解液ｐＨ值５，脱色时间１．５ ｈ。 关键词：枸杞多糖；酶法提取；脱色 中图分类号：ＴＳ２５５ 文献标志码：Ａ ｃｌｏｉ：１０．３９６９／ｊｉｓｓｎ．１６７１—９６４６（Ｘ）．２０１２．０８．０１４ Ｒｅｓｅａｒｃｈ ｏｎ Ｌｙｃ ｉｕｍ ＢＩＴＩ＇ｂ ｏｌ＇ｉｚｍ Ｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅｓ ｂｙ Ｅｎｚｙｍｅ Ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ ａｎｄ Ｄｅｃｏｌｏｕｒａｔｉｏｎ ＺＯＵ Ｄｏｎｇ－ｈｕｉ，ＬＩ Ｇｕｏ－ｑｕａｎ （Ｋｅｙ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ ｏｆＰｒｏｃｅｓｓｉｎｇ Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ Ｐｒｏｄｕｃｔｓ，Ｃｏｌｌｅｇｅ ｏｆＦｏｏｄ Ｓｃｉｅｎｃｅ，Ｑｉｑｉｈａｒ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ， Ｑｉｑｉｈａｒ，Ｈｅｉｌｏｎｇｊｉａｎｇ １６１００６，Ｃｈｉｎａ） Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｔｈｅ ｐａｐｅｒ ｄｉｓｃｕｓｓｅｓ ｔｈｅ ｏｐｔｉｍｕｍ ｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓ ｏｆ ｈｅ ｔＬｙｃｉｕｍ ｂａｒｂａｒｕｍ ｐｏｌｙｓａｃｅｈａｒｉｄｅｓ ｅｎｚｙｍａｔｉｃ ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ ａｎｄ ｄｅｃｏｌ— ｏｒａｔｉｏｎ．Ｕｓｉｎｇ ｐａｐａｉｎ ａｎｄ ｃｅｌｌｕｌｏｓｅ ｅｎｚｙｍｅ ｃｏｍｐｌｅｘ ｐｒｏｃｅｓｓｉｎｇ，ｔｈｅ ｂｅｓｔ ｄｅｃｏｌｏｒａｔｉｏｎ ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ ｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓ ａｒｅ ｄｅｔｅｒｍｉｎｅｄ ｂｙ ｏｒｔｈｏｇｏｎａｌ ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔｓ ａｓ ｆｏｌｌｏｗｓ：ｑｕａｎｔｉｔｙ ｏｆ ａｃｔｉｖａｔｅｄ ｃａｒｂｏｎ ２．Ｏ％，ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ ３０ ｏＣ，ｐＨ ｖａｌｕｅ ５．０，ａｄｓｏｒｐｔｉｏｎ ｔｉｍｅ １．５ ｈ． Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ：Ｌｙｃｉｕｍ ｂａｒｂａｒｕｍ ｐｏｌｙｓａｅｅｈａｒｉｄｅｓ；ｅｎｚｙｍａｔｉｃ ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ；ｄｅｅｏｌｏｕｒａｔｉｏｎ 量，放人粉碎机中粉碎，将粉碎后的枸杞粉依次通 过４０，６Ｏ，８０，１００目筛，然后把各级枸杞粉分别 枸杞为茄科（Ｓｏｌａｎａｃｅａｅ）植物枸杞Ｌｙｃｉｕｍ 装到清洁干燥的烧杯中，置于真空干燥箱中待用。 ｃｈｉｎｅｎｓｅ Ｍｉｌｌ的成熟果实，是我国传统的滋补中药 苯酚，天津市科密欧化学试剂开发中心提供； ０引言 材。《本草纲目》中记载枸杞具有坚筋骨、补精气 诸不足、明目安神、令人长寿等功效ｆ１１。目前人们对 枸杞多糖进行了较广泛的研究，发现枸杞多糖具有 增强机体免疫力、抗肿瘤、抗衰老、降血脂、降血 糖、抗疲劳、护肝、防辐射、抗缺氧等功效ｌ ２ｌ，且无 任何毒副作用。 枸杞多糖附着的色素在色泽上不易被人们所接 受，制药生产中多用活性炭对其进行处理。本文采 用酶法提取枸杞多糖，并以脱色率和多糖损失率为 指标，对活性炭脱色工艺条件进行研究，以得出最 佳脱色工艺参数。 葡萄糖，天津市凯通化学试剂有限公司提供；活性 炭（粉状），沈阳市东兴试剂厂产品；硅藻土：西安 化学试剂厂产品；Ｓｅｐｈａｄｅｘ Ｇ一７５，Ｐｈａｒｍａｃｉａ公司提 供；纤维素酶，国药集团化学试剂有限公司提供； 木瓜蛋白酶，北京世纪时尚科贸有限公司提供；使 用试剂均为分析纯。 １．２试验仪器与设备 电子天平、７２２型紫外分光光度计、ＰＢ一１Ｏ型 ｐＨ计，北京赛多利斯仪器系统有限公司提供；真空 干燥箱，上海益恒试验仪器有限公司提供；电热恒 温水浴锅、ＴＨｚ一８２Ａ型台式恒温振荡器、离心机， 上海跃进医疗器械厂产品；九阳料理机，山东九阳 １材料与方法 小家电有限公司提供；Ｈ卜２ｓ型恒流泵，上海青浦 １．１试验材料与试剂 沪仪器厂产品；Ｓｐｅｃｔｕｍｏｎｅ傅里叶变换红外光谱仪， 将新鲜枸杞用清水洗净，去除泥沙等杂质，挤 美国ＰＥ公司提供。 压后适当切块，放入真空干燥箱干燥，待枸杞恒质 收稿日期：２０１２—０３—２９ 作者简介：邹东恢（１９６７一），男，黑龙江人，副教授，硕士，研究方向：生物工程及农产品深加工技术。 Ｅ－ｍａｉｌ：ｚｏｕｄｏｎｇｈ９９＠ｓｉｎａ．ｃｏｒｎ。 农产品加工・学刊 ２０１２年第８期 １－３酶法提取构杞多糖 分别为０．１％，Ｏ．２％，０．３％，Ｏ．４％，Ｏ．５％，Ｏ．６％，在 称取干燥的８Ｏ目粒度枸杞粉５ ｇ，放人到２５０ ｍＬ 温度５０℃水浴中浸提１ ｈ，测定多糖提取率。 的三角瓶中，加蒸馏水７０ ｍＬ，混合均匀后置于５Ｏ℃ 酶质量分数对多糖提取的影响见图２。 水浴锅中，水浴３０ ｍｉｎ，调节ｐＨ值；称取木瓜蛋白 ：： 酶和纤维素酶按一定比例混合，加入１０ ｍＬ蒸馏水 １０ 溶解，枸杞溶液放在水浴中预热至酶解温度，将酶 离８ 液加入到枸杞溶液中，在恒温振荡器上提取，反应 鬟： 结束，将三角瓶放到沸水锅中，１０ ｍｉｎ沸水浴灭酶， ２ 灭酶结束，冷却至室温，将酶提取液放入到离心管 Ｏ 中，４ ５００ ｒ／ｍｉｎ离心，取上清液，即得到酶提取多 酶质量分数 糖液。 １．４葡萄糖标准曲线绘制与多糖含量测定 用苯酚一硫酸比色法测定多糖含量ｌ ３＿，得葡萄糖 标准曲线的回归方程为： Ｙ＝０．５５２ ８Ｘ＋０．０１ １ ４．Ｒ ＝０．９９６ １． １．５多糖的分离提取及脱色率测定 酶解之后取清液，透析后去除杂蛋白，活性炭 （２％）脱色１ ｈ，加入体积分数９５％的乙醇，使溶液 中乙醇的体积分数达到７５％，进行醇沉，醇沉过程中 要将其保存在４℃冰箱中，保持２４ ｈ，４ ５００ ｒ／ｍｉｎ离 心１５ ｍｉｎ，取沉淀，置于真空干燥箱中干燥，即可 得到枸杞粗多糖。 脱色率的测定采用紫外分光吸收法 。 ２结果与分析 ２．１单因素试验 ２．１．１物料筛分粒度 将粉碎后的枸杞粉依次通过４０，６０，８０，１００ 目筛，取一定量样品，选择液料比２０，温度５Ｏ℃水 浴中浸提１ ｈ，枸杞多糖提取率分别为３．７％，３．９％， ４．３％，４．３％，４．２％。 液料比对枸杞多糖提取率的影响见图１。 液料比ｌ／ｍＬ：ｇ 图１ 液料比对枸杞多糖提取率的影响 由图１可知，筛分粒度８０～１００目的物料多糖提 取率最高，因此试验确定物料筛分粒度８０～１００目。 ２．１．２酶质量分数 称取８０目的枸杞粉５ ｇ，选择液料比２０：１，加 入适量酶（纤维素酶与木瓜蛋白酶质量比为１：１）， 控制酶质量分数（酶质量占枸杞粉质量的百分比） 图２ 酶质量分数对多糖提取的影响 从图２可以看出，随着酶质量分数的增加，多 糖提取率也逐渐增加，酶质量分数大于０．４％后提取 增加率趋于平缓。考虑酶的成本及提高效果，宜将 酶质量分数确定为０．４％。 ２．２枸杞多糖脱色正交试验 在脱色时间（１．５ ｈ）不变的条件下，对活性炭 用量、脱色温度、ｐＨ值３个因素进行正交试验，每 个因素选３个水平，分别以脱色率和多糖损失率为 考察指标，选用正交表 （３４）进行试验。 脱色试验因素与水平设计见表１，枸杞多糖脱色 正交试验结果与分析见表２。 表１ 脱色试验因素与水平设计 表２枸杞多糖脱色正交试验结果与分析
