・１６８・ 壹医堂 窒 生 旦箜 雀塑 期 ＥＮＡＮ ＭＥＤＩＣＡＬ ＲＥＳＥＡＲＣＨ Ａｐｒ ２０１３，Ｖｏ１．２２，Ｎｏ．２ 针对照射后继续培养２４ ｈ，３、１０ ｍＣｉ” Ｉ照射对细胞 核酸分子影响较大，癌细胞内ＰＯ２－基团氢键化变弱； 综上所述，初步推断” Ｉ照射普遍影响宫颈癌细 胞的蛋白质、核酸、脂类分子构象。本实验所设定剂量 ２ ８５０ ｃｍ 谱带普遍蓝移４ ｃｍ～，说明ＣＨ，基团伸缩 中，无论从谱带频移还是谱带强度变化角度分析， １０ ｍＣｉ” Ｉ照射影响宫颈癌细胞的效果都最明显， １０ ｍＣｉ” Ｉ照射可作为临床上” Ｉ治疗宫颈癌的有效 参考剂量。 参考文献 ［１］ 唐伟跃，唐文春．医用物理学［Ｍ］．北京：高等教育出版社，２ｏ１２： ３ｌ９－３３３． 振动谱带波数增加，膜脂碳氢链旁式构型增多，膜脂分 子内碳氢链构象无序化程度增强，原有脂类分子结构 被改变。１ ４５８ ｃｍ 均向低波数频移，说明” Ｉ照射后 ＣＨ，与不饱和基团或电负性基团连接，使ＣＨ，的对称 振动谱带向低频方向移动，造成。 对比分析各组峰形发现５、ｌ０、１５ ｍＣｉ组酰胺ＩＩ带 峰形相似，与其余各组相比表现较强，峰形尖，宽度大， 并且１０ ｍＣｉ照射组酰胺Ｉ带、ＩＩ带的相对峰强比 ［２］ 王健生，徐怡庄，石景森，等．傅立叶变换红外光谱用于食管癌及 癌旁正常组织结构的相关研究［Ｊ］．光谱学与光谱分析，２００３，２３ （５）：８６３－８６５． Ｉ㈨ ／Ｉ ：数值最小，推断１０ ｍＣｉ” Ｉ照射明显引起蛋 白质分子结构疏松无序，恶变细胞内部蛋白质相对含 量减少；２ ９５８ ｃｍ～、２ ８５０ ｃｍ 谱带的吸光度比Ｉ：。 ／ ［３］ 刘仁明，冀勇，唐伟跃，等．人体甲状腺癌组织红外光谱特征的研 究［Ｊ］．肿瘤基础与ｌ临床，２００６，１９（２）：９９．１ＯＯ． ［４］ 王凡，凌晓峰，杨展澜，等．直肠癌和直肠正常组织的傅立叶变换 Ｉ 在１０ ｍＣｉ照射组比值小，这说明膜脂中亚甲基基 团数量相对甲基基团数量增加明显，一方面是因为１０ ｍＣｉ” Ｉ照射增加宫颈癌细胞脂类分子的碳氢链旁式 结构最快，另一方面是因为癌细胞内ＤＮＡ次甲基化和 胶原含量降低引起甲基的相对数目减少。 红外光谱研究［Ｊ］．光谱学与光谱分析，２００３，２３（３）：４９８—５Ｏ１． ［５］ 黄大同．医用高等数学［Ｍ］．北京：科学出版社，２００７：２１１－２２２． ［６］ 翟中和．细胞生物学［Ｍ］．北京：高等教育出版社，１９９５：３４４－３４８． （收稿日期：２０１３－０３－２３） 噬血细胞综合征患儿细胞因子的变化与临床分析 任一帆，贾国存，邹旭凤，赵 瑞，吕艳琦 （郑州市儿童医院血液科河南郑州４５０００３） 摘要：目的：探讨噬血细胞综合征（ＨＬＨ）患儿血清中细胞因子的变化及意义。方法：应用酶联免疫吸附法 （ＥＬＩＳＡ）检测患儿人院时ＩＬ一１８、ＩＬ一１Ｏ、ＩＬ一１２、ＴＮＦ—ＯＬ、ＮＦ—ＫＢ及新碟呤水平变化，与健康对照组进行比较。 ＨＬＨ组各细胞因子间相关性分析采用Ｓｐｅａｒｍａｎ ｒａｎｋ相关性分析。结果：ＨＬＨ组患儿血清ＩＬ一１８、ＩＬ一１０、ＩＬ一 １２、ＮＦ—ＫＩ３及新碟呤水平均升高，与健康对照组相比差异有统计学意义（Ｐ＜０．０５），ＴＮＦ・ｏＬ升高不明显，与健 康对照组比较，差异无统计学意义（Ｐ＞０．０５）。ＩＬ—１０与ＮＦ—ＫＤ及新碟呤均呈正相关（ｒ＝０．７４７ Ｐ＜０．０５， ｒ＝０．５６７ Ｐ＜０．０５），ＩＬ一１８与ＩＬ一１２、ＴＮＦ一０【也呈明显正相关（ｒ：０．５４２ Ｐ＜０．０５，ｒ＝０．６８６ Ｐ＜０．０５）。结论： ＩＬ一１８、ＩＬ．１０、ＩＬ一１２、ＴＮＦ一０【、ＮＦ．ＫＩ３及新碟呤在ＨＬＨ发病机制中起重要作用，ＩＬ—ｌＯ和新碟呤明显升高和ＩＬ一 １８、ＩＬ １２及ＮＦ—ＫＩ３中等程度的升高对儿童ＨＬＨ早期诊断有重大意义。 关键词：噬血细胞综合征；细胞因子；酶联免疫吸附法；诊断 中图分类号：Ｒ ７２５．５ ｄｏｉ：１０．３９６９／ｊ．ｉｓｓｎ．１ｏ０４４３７ｘ２０１３．０２．００３ Ｃｈａｎｇｅ ａｎｄ ｃｌｉｎｉｃａｌ ｓｉｇｎｉｉｃａｎｃｅ ｏｆ ｃｙｔｏｋｉｆｎｅｓ ｆｏｒ ｈｅｍｏｐｈａｇｏｃｙｔ－ ｉｃ ｓｙｎｄｒｏｍｅ ｉｎ ｃｈｉｌｄｒｅｎ ＲＥＮ Ｙｉ—ｆａｎ，ＪＩＡ Ｇｕｏ－ｃｕｎ，ＺＯＵ Ｘｕ—ｆｅｎｇ，ＺＨＡＯ Ｒｕｉ，ＬＶ Ｙａｎ—ｑｉ （Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ ｏｆ Ｈｅｍａｔｏｌｏｇｙ，Ｚｈｅｎｇｚｈｏｕ Ｃｈｉｌｄｒｅｎ’Ｓ Ｈｏｓｐｉｔａｌ，Ｚｈｅｎｇｚｈｏｕ ４５０００３，Ｃｈｉｎａ） 基金项目：郑州市科技攻关项目（０７４ＳＧＹＳ３３１９９）。 通讯作者：贾国存，Ｅ—ｍａｉｌ：ｊｇｃｂｏ＠１６３．ｃｏｍ。 河南医学研究２０１３年４月第２２卷第２期ＨＥＮＡＮ ＭＥＤＩＣＡＬ ＲＥＳＥＡＲＣＨ Ａｐｒ ２０１３，Ｖｏ１．２２，Ｎｏ．２ ・ｌ６９・ Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ：Ｔｏ ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｅ ｔｈｅ ｃｈａｎｇｅ ｏｆ ｃｙｔｏｋｉｎｅｓ ｉｎ ｐａｔｉｅｎｔｓ ｗｉｔｈ ｈｅｍｏｐｈａｇｏｃｙｔｉｃ ｌｙｍ— ｐｈｏｈｉｓｔｉ０ｃｙｔｏｓｉｓ ａｎｄ ａｎａｌｙｚｅ ｔｈｅ ｃｌｉｎｉｃａｌ ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｃｅ ｏｆ ｔｈｅｓｅ．Ｍｅｔｈｏｄｓ：Ｔｈｅ ｌｅｖｅｌｓ ｏｆ Ｓｅｒｕｍ ＩＬ一 １８，ＩＬ一１０，ＩＬ－１２，ＴＮＦ一０【，ＮＦ—ＫＢ ａｎｄ Ｎｅｏｐｔｅｒｉｎ ｉｎ ｐａｔｉｅｎｔｓ ｗｅｒｅ ｄｅｔｅｒｍｉｎｅｄ ｂｙ ｅｎｚｙｍｅ ｌｉｎｋｅｄ ｉｍｍｕｎｏ ｓｏｒｂｅｎｔ ａｓｓａｙ，ｔｈｅｎ ｓｐｅａｒｍａｎ ｒａｎｋ ｃｏｒｒｅｌａｔｉｏｎ ｗｅｒｅ ｕｓｅｄ ｔｏ ａｎａｌｙｚｅ ｔｈｅ ｒｅｌａｔｉｏｎｓｈｉｐ ｂｅ－ ｔｗｅｅｎ ｃｙｔｏｋｉｎｅｓ ｉｎ ｔｈｅ ＨＰＳ ｇｒｏｕｐ．Ｒｅｓｕｌｔｓ：Ｔｈｅ ｌｅｖｅｌｓ ｏｆ ＩＬ一１ ０，Ｎｅｏｐｔｅｒｉｎ，ＩＬ－１ ８，ＩＬ一１ ２ ａｎｄ ＮＦ— ＫＢ ｉｎ ｔｈｅ ＨＰＳ ｇｒｏｕｐ ｗｅｒｅ ｈｉｇｈｅｒ ｔｈａｎ ｈｅａｌｔｈｙ ｃｏｎｔｒｏｌ（Ｐ＜０．０５）．Ｔｈｅ ｉｎｃｒｅａｓｅ ｏｆ ＴＮＦ一仅ｗａｓ ｎｏｔ ｏｂｖｉｏｕｓ ｔｈａｎ ｈｅａｌｔｈｙ ｃｏｎｔｒｏｌ（Ｐ＞０．０５）．Ｉｎ ｔｈｅ ＨＰＳ ｇｒｏｕｐ，Ｔｈｅ ｌｅｖｅｌｓ ｏｆ ＩＬ一１ ０ ｈａｄ ｐｏｓｉｔｉｖｅ ｃｏｒ－ ｒｅｌａｔｅｏｎｓ ｗｉｔｈ ＮＦ—ＫＩ３（ｒ＝０．７４７ Ｐ＜０．Ｏ１），ａｎｄ ｎｅｏｐｔｅｒｉｎ（ｒ＝０．５６７ Ｐ＜０．０５）．Ｔｈｅ ｌｅｖｅｌ ｏｆ ＩＬ－１８ ｈａｄ ｄｉｓｔｉｎｃｔｌｙ ｐｏｓｉｔｉｖｅ ｃｏｒｒｅｌａｔｉｏｎｓ ｗｉｔｈ ＴＮＦ・ （ｒ＝０．６８６ Ｐ＜０．０１）ａｎｄ ＩＬ一１２（ｒ＝０．５４２ Ｐ ＜０．０５）．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ：Ｔｈｅ ｓｉｇｎｉｉｆｃａｎｔ ｉｎｃｒｅａｓｅ ｏｆ ＩＬ．１ ０ ａｎｄ Ｎｅｏｐｔｅｒｉｎ ｗｉｔｈ ｍｏｄｅｒａｔｅ ｉｎｃｒｅａｓｅ ｏｆ ＩＬ一１８、ＩＬ一１２ ａｎｄ ＮＦ—Ｋｔ３ ｐｌａｙ ａ ｒｏｌｅ ｉｎ ｐａｔｈｏｇｅｎｅｓｉｓ ａｎｄ ｅａｒｌｙ ｄｉａｇｎｏｓｉｓ ｏｆ ｃｈｉｌｄｒｅｎ ｗｉｔｈ ＨＬＨ． Ｋｅｙｗｏｒｄｓ：ｈｅｍｏｐｈａｇ０ｃｙｔｉｃ ｓｙｎｄｒｏｍｅ；ｃｙｔｏｋｉｎｅ；ｅｎｚｙｍｅ ｌｉｎｋｅｄ ｉｍｍｕｎｏ ｓｏｒｂｅｎｔ ａｓｓａｙ；ｐｒｏｇｎｏｓｉｓ 噬血细胞综合征（ＨＰＳ），又称噬血细胞性淋巴组 头购自德国ＢＲＡＶＤ公司，恒温水箱购自北京市医 织细胞增多症（ＨＬＨ），由Ｆａｒｑｕｈａｒ等¨ 于１９５２年首 疗设备厂，离心机购自安徽中科中佳科学仪器有限 次报道，可见多脏器受损，病情进展迅猛，延误诊治病 公司。 死率高的临床特点。该病是由多种致病因素引起的淋 １．３细胞因子测定 抽取患儿及健康对照组儿童空 巴细胞和组织细胞过度增殖、活化，产生大量炎症因 腹静脉血２ ｍｌ，３ ０００ ｒ／ｍｉｎ离心１０ ｒａｉｎ后分离血清， 子，从而引起的一种可危及生命的过度炎症反应 。 按一次用量分装，冻存于一２０。冰箱备用。检测之前室 本研究对收治的ＨＬＨ患儿血清细胞因子ＩＬ．１８、ＩＬ． 温下溶解标本，并提前２０ ｍｉｎ取出试剂盒，平衡至室 １Ｏ、ＩＬ一１２、ＴＮＦ—Ｏｔ、ＮＦ—ＫＩ３及新碟呤进行检测，观察其变 温。严格按照ＥＬＩＳＡ试剂盒说明书步骤检测ＩＬ １８、 化，并探讨其在ＨＬＨ发病机制中的作用和临床意义， ＩＬ一１０、ＩＬ一１２、ＴＮＦ一０【、ＮＦ—ＫＢ及新碟呤水平。 现报告如下。 １．４统计学处理应用ＳＰＳＳ１７．０软件，数据 ±ｓ表 １资料与方法 示，ＨＬＨ组与健康儿童组之间采用ｔ检验比较，检验水 准ｏ／＝０．０５。ＨＬＨ组各细胞因子间相关性分析采用 １．１ 一般资料 以２０１１年１月至２０１２年５月在郑 Ｓｐｅａｒｍａｎ ｒａｎｋ相关性分析。 州市儿童医院血液肿瘤科收治的１６例ＨＬＨ患儿为研 究对象，其中男９例，女７例，年龄３．２个月一５．６岁。 ２ 结果 病例诊断均符合ＨＬＨ．２００４诊断标准 ，确诊前无糖 ＨＬＨ组ＩＬ一１８、ＩＬ一１Ｏ、ＩＬ一１２、ＮＦ－ＫＢ、ＴＮＦ．仅及新碟 皮质激素应用史。ｌ０例健康对照组为郑州市儿童医 呤水平均升高，与健康对照组比较差异均有统计学意 院同期门诊体检健康儿童，男６例，女４例；年龄５个 义（Ｐ＜０．０５）。其中ＩＬ．１０、新碟呤水平明显升高，与 月一８岁，无心、肝、肾脏疾病及遗传代谢性疾病，健康 健康对照组比较差异均有显著统计学意义（Ｐ＜ 对照组家长均知情同意。各组资料具有可比性。 ０．０１）。ＴＮＦ． 升高不明显，与健康组比较差异无统 １．２试剂和仪器 ＥＬＩＳＡ试剂盒购自美国ＲＢ公司， 计学意义（Ｐ＞０．０５），这与报道相符 。见表１。 酶标仪购自上海热电仪器有限公司，高精度加样器及 表１ ＨＬＨ患儿与健康对照组儿童细胞因子水平比较（ ±ｓ） ＩＬ－１０与ＮＦ－ＫＢ及新碟呤均呈正相关（ｒ＝０．７４７ 尸＜０．０５，ｒ＝０．５６７ Ｐ＜０．０５），ＩＬ一１８与ＩＬ一１２、ＴＮＦ－ 核 Ⅱ 子 Ｏ 因 Ⅱ ８ Ⅱ ２ 新 呤 碟 ＨＥＮＡＮ ＭＥＤＩＣＡＬ ＲＥＳＥＡＲＣＨ Ａｐｒ ２０１３．￣ｏｉ．２２。Ｎｏ．２ 河南医学研究２０１３年４月第２２卷第２期ｒ ｐ ｒ Ｐ ｒ Ｐ ｒ Ｐ ｒ Ｐ 也呈明显正相关（ｒ＝０．５４２ Ｐ＜０．０５，ｒ＝０．６８６ Ｐ＜ ０．０５）。见表２。 表２ ＨＬＨ患儿细胞因子水平相关性分析 ＩＬ一１Ｏ ＩＬ．１８ 一０ Ｏ ０ ＩＬ一１２ 新碟呤ＴＮＦ— Ｏ ０ ０ Ｏ Ｏ Ｏ Ｏ Ｏ ３ 讨论 本研究的１６例ＨＬＨ患儿均符合ＨＬＨ一２００４诊断 标准，该标准认为只要符合ＨＬＨ的分子诊断和８条临 床诊断中的５条，即能确诊ＨＬＨ。但是由于技术水平 ，目前国内尚不能完成所有与ＨＬＨ相关的染色体 基因缺陷的检测。而且，临床观察发现，很多ＨＬＨ患 儿病程初期很难同时满足５条诊断标准，随着病程进 展，各种症状逐一出现，最终确诊为ＨＬＨ。但是ＨＬＨ 病情进展十分迅速，延误诊断和治疗可导致患儿病情 无法控制而死亡，因此，ＨＬＨ的早期诊断十分必要，而 ＨＬＨ一２００４方案仍需进一步完善。 ＨＬＨ分为原发性或遗传性ＨＬＨ和继发性ＨＬＨ 两类，其中原发性ＨＬＨ又分为家族性ＨＬＨ和免疫缺 陷病两类。原发性ＨＬＨ患者多有噬血家族史或被证 明有明确的基因突变，多于１岁之前发病，偶见青少年 和成年患者 。继发性ＨＬＨ分为感染相关性ＨＬＨ （ＩＡＨＳ），肿瘤相关性ＨＬＨ（ＭＡＨＳ）、自身免疫相关性 ＨＬＨ（ＭＡＳ）、药物相关性ＨＬＨ、移植后ＨＬＨ等 。该 病具体发病机制不明，但多数认为免疫系统参与了该 病的发病过程。该观点认为，基因缺陷、感染及肿瘤等 病因引起机体免疫系统紊乱，使Ｔ细胞持续增殖，产 生大量的ＩＦＮ．，导致巨噬细胞大量活化，活化的巨噬 细胞又分泌大量的细胞因子，如：ＩＬ一１２、ＩＬ一１０、ＩＬ一１８、 ＴＮＦ—ｏＬ及其他白介素类，其中ＩＬ．１２能诱导分泌Ｔｈｌ 细胞因子的细胞发展并促进这些细胞和ＮＫ细胞产生 ＩＦＮ．，形成恶性循环 ，这就是所谓的“细胞因子风 暴”学说。 在本研究中，ＨＬＨ患儿确诊时ＩＬ－ｌ８、ＩＬ－１０、ＩＬ一 １２、ＮＦ．ＫＳ及新碟呤水平与健康对照组相比均升高， 尤其ＩＬ．１Ｏ、新碟呤水平明显升高，再一次证实了细胞 因子确实参与了ＨＬＨ的病理生理作用。与健康组相 比，ＨＬＨ患儿确诊时血清ＴＮＦ一仅升高不明显。ＴＮＦ． 是造血干细胞增殖的抑制性因子，能使骨髓粒系、红系 及巨核细胞进行性减少，ＨＬＨ患儿确诊时血清ＴＮＦ一 升高不明显，但是却有明显的外周血两系以上减少，考 虑与骨髓中的噬血细胞对血细胞的破坏有关。 ＮＦ—Ｋ６几乎存在于机体的各种细胞中，它是具有 基因转录调节作用的核因子，是急性炎症反应的中枢 环节，在调节免疫应答、炎症反应和细胞增殖分化以及 凋亡方面均起关键作用，能在氧化期上调有关炎症因 子基因的转录。本研究证实，ＩＬ一１Ｏ与ＮＦ．ＫＢ呈明显 正相关，可能与ＮＦ—Ｋ［３上调了ＩＬ－ｌ０的基因转录有关。 ＩＬ．１０主要有单核／巨噬细胞、Ｔ细胞、Ｂ细胞分泌，能 促进Ｂ细胞增殖、分化及抗体产生。新碟呤主要由活 化的巨噬细胞及树突状细胞产生，是参与机体炎症反 应的一个重要因子，本研究提示，ＩＬ一１０与新碟呤呈明 显正相关，但具体作用机制仍待进一步研究。 ＩＬ一１８是ＩＬ家族中的重要成员之一，主要由Ｔｈｌ～～ 细胞产生。ＩＬ．１８在ｃａｓｐａｓｅ．１的催化下成为有活性的 细胞因子，可被单核吞噬细胞连续表达。ＩＬ １８与ＩＬ一 一１２共同维持Ｔｈｌ的免疫活性，可促进Ｔ淋巴细胞和 ＮＫ细胞产生ＩＦＮ．和ＴＮＦ． 以及在淋巴细胞中诱发 Ｆａｓ配基的表达，本研究显示ＩＬ一１８与ＩＬ．１２、ＴＮＦ—Ｏｔ呈 明显正相关，与上述理论吻合，提示以上病理机制可能 参与了ＨＬＨ病理生理过程。 参考文献 一 ～～
