HPLC测定泌淋清胶囊中盐酸小檗碱的含量

第２７卷第４期　安徽中　医学院学报　Ｖｏ１．２７　Ｎｏ．４　Ａｕｇ．２００８　２００８年８月　ＪＯＵＲＮＡＬ　ＯＦ　ＡＮＨＵＩ　ＴＣＭ　ＣＯＬＬＥＧＥ　・方药研究・　ＨＰＬＣ测定泌淋清胶囊中盐酸小檗碱的含量　陈　敏，凌丽美　，马　征。，李心伟。，岑德意。，陈志武。　（安徽省黄山市人民医院，安徽黄山２４５０００）　摘要：目的：建立ＨＰＬＣ测定泌淋清胶囊中盐酸小檗碱含量的方法。方法：采用ＨＰＬＣ，用十　八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，乙腈一０．０３３　ｍｏｌ／Ｌ磷酸二氢钾溶液（４０：６０）为流动相－．流速ｌ　ｍｌ／ｍｉｎ，柱温２５℃，理论板数按标准规定应不低于２　０００，检测波长为３４５　ｎｍ。结果：盐酸小檗碱　含量为０．Ｏ８～Ｏ．４０　ｇ时与峰面积呈良好的线性关系，ｒ一０．９９９　９，平均加样回收率为９９．９　，　ＲＳＤ一１．２Ｏ　（　一５）。结论：ＨＰＬＣ快速、准确、稳定、重现性好，可用于该制剂成分的含量测定。　关键词：泌淋清胶囊；盐酸小檗碱；高效液相色谱法　中图分类号：Ｒ９２７．２文献标识码：Ａ文章编号：１０００—２２１９（２００８）０４—００５０—０２　泌淋清胶囊是由四季素、黄柏、酢浆草、仙鹤草、　白茅根、车前草６昧中药制成的复方制剂Ⅲ，具有清　热解毒、利尿通淋之功效，用于湿热蕴结所致的小便　不利、淋漓涩痛、尿血、急性非特异性尿路感染、前列　作者简介：陈敏（１９５６一），女，主管药师　ｌ安徽省黄山市药检所　２安徽省医学科学研究院　腺炎等。为了控制产品质量，保证临床用药的有效　性，参照《中华人民共和国药典）２００５版一部“盐酸　小檗碱”项下的含量测定方法，经试验制定了本品的　含量测定方法，采用ＨＰＬＣ测定盐酸小檗碱的含量。　１仪器与试药　Ａｇｌｉｅｎｔ　１１００高效液相色谱仪；紫外检测器；　ＭＥＴＴＬＥＲ　ＴＯＬＥＤＯ　ＡＢ１３５－Ｓ电子天平，上海天　３安徽医科大学药理教研室　乳酸的清除速度和降低血清尿素氮水平，增加有氧　代谢，加快疲劳消除和体力恢复，从而提高对运动负　荷的适应性和机体的运动能力。见表１。　表ｌ　复方丹参制剂对大鼠力竭性游泳时间、血　衰竭大鼠心肌细胞凋亡，改善心衰竭动物血液动力　学。枸杞子、海桐皮、杜仲具有补肝肾、强筋骨的功　效；黄芪可提高机体乳酸脱氢酶的活性，．使机体血红　蛋白含量升高，有效地增加肌力和抗疲劳功能［３］。　乳酸、血清尿素氮含量的影响（　一１０，ｘ－±ｓ）　甘草能提高机体在剧烈运动下的应激雏：力Ｈ］。运动　性疲劳时，机体内环境剧烈变化，血乳酸堆积，能量　与氧气快速消耗。复方丹参制剂从整体上调整和改　善机体运动状态下的内环境平衡，提高对血乳酸的　清除速度，增加有氧代谢，加快疲劳消除和体力恢　与对照组比较，＃Ｐ＜Ｏ．０５　复。实验结果提示复方丹参制剂有一定的抗运动性　疲劳作用。　参考文献：　４讨论　运动性疲劳是指运动时机体生理过程不能持　续，其功能在某一特定水平上和（或）不能维持预定　［１］何来英，严卫星，楼密密，等．保健食品抗疲劳作用　试验方法研究［Ｊ］．中国食品卫生杂志，１９９７，９《：４）：９ｏ一９ｌ，　［２］唐晖，汪保，贺洪．中国运动医学杂志［Ｊ］，２００２，２１　（４）：３７５—３７６．　的运动强度，机体运动能力下降的现象。研究表明　运动后血乳酸的堆积是疲劳产生不可忽视的因　素口　。运动性疲劳属中医学“劳倦内伤”范畴。劳倦　伤气，气虚运血乏力而血行不畅，导致血瘀，经络不　［３］欧阳萍．运动性疲劳发生机制及其防治［Ｊ］．沈阳体　育学院学报，２３（３）：３２５—３２６．　和，因而出现肌肉酸痛、骨骼乏力等症状。方中丹　参、红花、当归活血化瘀，行气止痛，改善微循环，提　高机体在低氧状态下的耐受力。其中丹参可抑制心　５０　［４］吴葆杰．中草药药理学［Ｍ］．北京：人民卫生出版　社，１９８３：１２３，１９７，２１７．　（收稿日期：２００８－一０５—２Ｏ）　维普资讯 http://www.cqvip.com 平仪器厂；盐酸小檗碱对照品购自中国药品生物制　品检定所（批号１１０７１３－２００２０８）；甲醇为色谱纯，水　时与峰面积有良好的线性关系。　２．６精密度试验取同一对照品溶液，连续进样５　为重蒸水；其余试剂均为分析纯。泌淋清胶囊由贵　次，每次１０　ｌ，测定峰面积，计算相对标准偏差　州和仁堂药业有限公司提供（批号２００７０１０８，　２００７０１０９，２００７０１１０）。　ＲＳＤ＝０．５１％，试验结果表明本实验精密度较好　］。　２．７重复性试验取同一批样品，分别制备６份供　试品溶液，按上述色谱条件测定盐酸小檗碱含量，其　中相对标准偏差ＲＳＤ一１．１６　，实验结果表明本法　重现性较好。　２方法与结果　２．１色谱条件　色谱柱为十八烷基硅烷键合硅胶　柱（Ｋｒｏｍａｓｉｌ　Ｃｌ８　４．６　ｍｍ×２５０　ｍｍ，５　ｍ），流动相　为乙腈一０．０３３　ｍｏｌ／Ｌ磷酸二氢钾溶液（４０：６０），流速　２．８　稳定性试验　取同一份供试品溶液，分别于　１　ｍｌ／ｍｉｎ，检测波长为３４５　ｎｍ，柱温２５℃。理论板　数按标准规定应不低于２　０００。　２．２　对照品溶液制备精密称取在１０５℃干燥至　恒质量的盐酸小檗碱对照品适量，加甲醇制成每毫　升含４０　ｇ的对照品溶液。　２．３供试品溶液制备　精密称取泌淋清胶囊中内　容物，研细，取０．１　ｇ置２５　ｍｌ量瓶中，加盐酸一甲醇　（１：１００）混合溶液１５　ｍｌ，超声处理２０　ｍｉｎ，取出放冷　至室温，加甲醇稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，　作为供试品溶液。　２．４阴性对照溶液制备　取不含黄柏药材的阴性　对照制剂，按“２．３项”方法制备即得阴性对照溶液。　在实验条件下得到ＨＰＬＣ图谱，阴性无干扰。见图　１、图２。　目　ｆ…　图１　盐酸小檗碱对照品高效液相色谱图　目　…）　图２泌淋清胶囊样品高效液相色谱图　２．５　线性考察试验　精密吸取对照品溶液（４０　ｍｇ／Ｌ）２，４，６，８，１０　ｔＬ１，注入液相色谱仪，按上述　色谱条件进行测定　］，记录峰面积，以峰面积积分值　为纵坐标，以对照品溶液的进样量为横坐标，绘制标　准曲线，计算回归方程为：Ａ一０．００２　５＋１０．８９５　７ｃ，　ｒ一０．９９９　９，表明盐酸小檗碱含量为０．０８～０．４０／ｚｇ　０，４，８，１２，２４　ｈ进样１０　ｌ，记录色谱峰面积，ＲＳｐ一　１．０６　。结果表明供试品溶液在２４　ｈ内稳定。　２．９加样回收率试验采用加样回收法，精密称取　已知含量的同一份样品５份，分别精密加入盐酸小　檗碱对照品适量，按“２．３项”方法制备样品液，测得　盐酸小檗碱平均回收率为９９．９　，ＲＳＤ一１．２０　。　见表１。　６●　　６●　　６●　　６●　　６●　　表１盐酸小檗碱回收率测定结果　４　４　４　４　４　６　６　６　６　６　。样品含量加入量　测得量　回收率平均值ＲＳＤ　堋亍　（ｍｇ）　（ｍｇ）６　　６　６　（ｍｇ）６　６　　（　）　（　）（％）　●　●　●　●　●　２　３　２　４　６　Ｏ　４　５　ｌ　Ｏ　ｌ　ｌ　ｌ　ｌ　ｌ　２●　　２●　　２●　　２●　　３●　　４　７　７　９　２　２　６　９　ｌ　２　３样品含量测定　｝　９　９　Ｏ　Ｏ　Ｏ　３批样品２００７０１０８、２００７０１０９、２００７８●　　９●　　Ｏ　●　Ｏ●　　ｌ●　　　０１１０含量　ｌ　６　６　３　２　测定结果见表２。　２　８　６　３　２　表２　３批样品含量测定结果　９　９　●　９　９　ｌ　●　２　Ｏ　４讨论　本研究采用盐酸一甲醇（１：１００）混合溶液对泌淋　清胶囊中内含物进行超声处理，提取效果较好，同时　在流动相中加入少许磷酸二氢钾溶液，可有效防止　盐酸小檗碱色谱峰拖尾。结果表明ＨＰＬＣ测定泌　淋清胶囊中盐酸小檗碱含量的方法具有快速、准确、　重现性好等特点，可为该品种质量控制提供检　测依据。　参考文献：　［１］张凤芹，葛向党．黄柏中盐酸小檗碱含量测定方法　［Ｊ］．辽宁中医药大学学报，２００６，８（４）：１２６—１２７　．　［２］周文枭，曾立威，刘伟林．ＨＰＬＣ测定三黄片中盐酸　小檗碱的含量［Ｊ］．华西药学杂志，２００４，１９（３）：２２Ｏ一２２１．　Ｅ３］张伟奇．ＨＰＬＣ法测定盆炎愈胶囊中盐酸小檗碱的　含量［Ｊ］．中国实验方剂学杂志，２００４，ｌＯ（１）：１５—１６．　（收稿日期：２００７—１１—１８）　５１