第３８卷第１期 Ｖｏ１．３８ Ｎｏ．１ 井冈山大学学报（自然科学版） ２０１７年１月 Ｊａｎ．２０１７ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｊｉｎｇｇａｎｇｓｈａｎ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ（Ｎａｔｕｒａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅ） ９３ 文章编号：１６７４—８０８５（２０１７）０１．００９３．０４ 脂肪乳注射液中大豆油的稳定性考察 程伟青 ， 严拯宇２ （１．福建生物工程职业技术学院，福建，福州３５０００２；２．中国药科大学理学院药物质量安全与预警教育部重点实验室，江苏，南京２１１１９８） 摘要：目的采用高效液相色谱．蒸发光散射检测器（ＨＰＬＣ．ＥＬＳＤ）法测定脂肪乳注射液中大豆油在不同条件下 的含量变化。方法以硅胶柱，正己烷．异丙醇．冰醋酸（８９．９：１．０：０．１）为流动相，ＥＬＳＤ检测。结果温度对 本品质量影响较大，宜在２５℃条件下贮存。结论脂肪乳注射液在加速试验和长期试验中大豆油的含量符合相关 药品标准。 关键词：大豆油；脂肪乳注射液；高效液相色谱；稳定性 中图分类号：０６５７．７＋２ 文献标识码：Ａ ＤＯＩ：１０．３９６９／ｊ．ｉｓｓｎ．１６７４．８０８５．２０１７．０１．０１８ ＳＴＡＢＩＬＩＴＹ ＩＮＶＥＳＴＩＧＡＴＩｏＮ ｏＮ ＳｏＹＢＥＡＮ ｏＩＬ ＩＮ ＴＨＥ Ｉ Ｔ ＥＭＵＬＳＩｏＮ ＩＮＪＥＣＴＩｏＮＳ ＣＨＥＮＧ Ｗｌｅｉ—ｑｉｎｇ ，。ＹＡＮ Ｚｈｅｎｇ—ｙｕ （１．ＦｕｊｉａｎＶｏｃａｔｉｏｎａｌ Ｃｏｌｌｅｇｅ ｏｆＢｉｏｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ，Ｆｕｚｈｏｕ，Ｆｕｊｉａｎ ３５０００２，Ｃｈｉｎａ； ２．Ｓｃｈｏｏｌ ｏｆＳｃｉｅｎｃｅ，Ｃｈｉａｎ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｋｅｙ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ ｏｆＤｒｕｇ Ｑｕａｌｉｔｙ Ｃｏｎｔｒｏｌ ａｎｄ Ｐｈａｒｍａｃｏｖｉｇｉｌａｎｃｅ，Ｍｉｉｎｓｔｒｙ ｏｆＥｄｕｃａｔｉｏｎ，Ｎａｎｊｉｎｇ， Ｊｉａｎｇｓｕ ２１１１９８，Ｃｈｉｎａ） Ａｂｓｔｒａｃｔ Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ：Ａｎ ＨＰＬＣ－ＥＬＳＤ ｍｅｔｈｏｄ ｗａｓ ａｐｐｌｉｅｄ ｔｏ ｄｅｔｅｒｍｉｎｅ ｔｈｅ ｃｏｎｔｅｎｔ ｃｈａｎｇｅ ｏｆ ｓｏｙｂｅａｎ ｏｉｌｉｎ ｆａｔ ｅｍｕｌｓｉｏｎ ｉｎｊｅｃｔｉｏｎｓ．Ｍｅｔｈｏｄｓ：Ａ ｓｉｌｉｃａ ｇｅｌ ｃｏｌｕｍｎ ｗａｓ ｕｓｅｄ，ｗｉｔｈ ｔｈｅ ｍｏｂｉｌｅ ｐｈａｓｅ ｏｆ ｈｅｘａｎｅ：ｉｓｏｐｒｏｐｙｌ ａｌｃｏｈｏｌ： ｇｌａｃｉａｌ ａｃｅｔｉｃ ａｃｉｄ ａｓ ８９．９：１．０：０．１ ｗｉｔｈ ｔｈｅ ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎ ｏｆ ＥＬＳＤ．Ｒｅｓｕｌｔｓ：ｎｌｅ ｒｅｓｕｌｔｓ ｓｈｏｗｅｄ ｔｈａｔ ｔｈｅ ｆａｔ ｅｍｕｌｓｉｏｎ ｉｎｉｅｃｔｉｏｎｓ ｗｅｒｅ ｕｎｓｔａｂｌｅ ａｔ ｈｉｇｈ ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ ａｎｄ ｉｔ ｓｈｏｕｌｄ ｂｅ ｓｔｏｒｅｄ ａｔ ａｂｏｕｔ ２５℃．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ：Ｔｈｅ ｃｏｎｔｅｎｔｓ ｏｆ ｓｏｙｂｅａｎ ｏｉｌ ｉｎ ｆａｔ ｅｍｕｌｓｉｏｎ ｉｎｊｅｃｔｉＯＩｌＳ ｃｏｕｌｄ ｍｅｅｔ ｔｈｅ ｒｅｌａｔｅｄ ｄｒｕｇ ｓｔａｎｄａｒｄ ｂｏｔｈ ｉｎ ｔｈｅ ａｃｃｅｌｅｒａｔｅｄ ｔｅｓｔ ａｎｄ ｌｏｎｇ－ｔｅｒｍ ｔｅｓｔ． Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ：ｓｏｙｂｅａｎ ｏｉｌ；ｆａｔ ｅｍｕｌｓｉｏｎ ｉｎｊｅｃｔｉｏｎｓ；ＨＰＬＣ；ｓｔａｂｉｌｉｌｙ 脂肪乳注射液是将植物油（精制大豆油）、乳化 有高敏感性，这些因素会影响药物的质量与疗效， 剂（大豆磷脂或卵磷脂）和注射用水制成的水包油型 因此要进行药品的稳定性考察【３ ］。药物的稳定性主 乳剂，其脂微粒小于ｌ／２ｍ，临床用于补充机体必需 要考察光线、湿度、温度等因素对药品质量的影响， 脂肪酸和提供机体能量等【ｌ】。其主要成分大豆油， 包括影响因素试验、加速试验和长期留样试验，是 为人体提供热量、必需脂肪酸及脂溶性维生素，是 药品安全性和临床疗效的指标。本课题组在对脂肪 人类生活的必需品。而大豆油在加工和贮藏过程中 乳注射液中大豆油进行含量测定后【６】继续考察了该 会受温度、光照、氧气等诸多因素的影响，会发生 注射液中大豆油在不同条件下的含量变化及影响 酸败而改变其品质【２Ｊ。 其变化的主要影响因素，为脂肪乳注射液在生产、 药物对其贮存环境如温度、光照、湿度等因素 运输、贮存条件及有效期等方面提供参考。 收稿日期：２０１６－１０－１０：修改日期：２０１６－１２—１２ 基金项目：福建省科技平台建设（福建省生物医药产业中试与检测技术公共服务平台２０１４Ｙ２００８）：福建生物工程职业技术学院科研计划项目（２０１４ｋｊ０２） 作者简介：程伟青０９８２－）。女，福建龙岩人，讲师，硕士，主要从事药物质量检测研究（Ｅ—ｍａｉｌ：ｃｗｑｄｏｇ＠１２６．ｃｏｒｎ）； 严拯字（１９５５－），女，河南开封人，教授。博士，博士生导师，主要从事药品质量安全研究ｆＥ－ｍａｉｌ 井冈山大学学报（自然科学版） １ 实验部分 １．１仪器与试剂 棕色量瓶中，加流动相Ａ稀释至刻度，摇匀，作为储 备液；移取贮备液制成０．０１、０．ｏ２、０．ｏ４、０．０６、０．０８、 ０．１ ｍＬ的标准系列溶液。以ｌ ｇｃ＿为横坐标， 高效液相色谱仪（ＳＨＩＭＡＤＺＵ ＳＰＤ一１０Ａ）；色 谱柱（硅胶柱，５ ｌｘｍ，４．６ ｎｌｌｌｌ×２５０ ｍｍ）；蒸发光 为纵坐标，进行线性回归，其方程为ｌｅＡ＝１．３４８２ ｌ ｇＣｌ＋ ８．２７１２，ｒ＝０．９９９７。大豆油在０．０１～０．１ ｍｇ／ｍＬ的范 散射检测器；脂肪乳注射液（四川科伦药业，规格 ２０％，批号Ｆｌ１０５１９０２－１、Ｆｌ１０５１９０２．２和Ｆｌｌ０５２００１．１）； 围内线性关系良好。 １．２．２．３ 回收率 大豆油（中国食品药品检定研究院，含量１ｏ０％， 批号１００２７７．２００３０１）；溶血磷脂酰胆碱（ＳＩＧＭＡ， 含量９９％，批号０５５Ｋ５２０１），磷脂酰乙醇胺 精密移取１．２．３项下的供试品溶液，稀释一倍， 加入对照品大豆油适量，制成含大豆油分别为标示 量８０％，１００％￣ｎ １２０％三个水平的的模拟制剂，每 （ＳＩＧＭＡ，含量９９％，批号：０８４Ｋ１１６９）：正庚 烷和异丙醇为色谱纯。 １．２方法与结果 个水平３份，测定本方法的回收率，回收率ＲＳＤ％ ＝１．５％。表明本法的准确度良好。 取浓度为０．０６ｍｇ／ｍＬ的对照品溶液重复进样５ １．２．２．４ 精密度 １．２．１ 色谱条件 流动相：正己烷．异丙醇．冰醋酸（８９．９：１．０：０．１）， 次，以峰面积计算ＲｓＤ＝１．２％，本法的精密度满足 试验的要求。 １．２．２．５ 检测限与定量限 ’流速：１．０ ｍＬ／ｍｉｎ；蒸发光散射检测器：蒸发温度 ７０℃，雾化温度５０℃，流速：１．６ Ｌ／ｍｉｎ；进样体积： ２０“Ｌ。 取标准曲线下０．１ ｍｇ／ｍＬ的对照品溶液，用流 动相Ａ稀释至一定浓度的溶液，按信噪比为３：１得 １．２．２方法学考察 １．２．２．１专属性试验 取脂肪乳注射液０．４ ｍＬ，置２５ ｍＬ棕色量瓶 到其最低检出限为１ ｒｔｇ／ｍＬ，按信噪比为ｌ０：１得到 其最低定量限为５￣ｇ／ｍＬ。 中，加流动相稀释至刻度，摇匀；取上述溶液２ ｍＬ （４份），分置２５ ｍＬ量瓶中，分别进行高温、碱、 酸、和氧化破坏试验各３０ ｍｉｎ，酸、碱破坏样品最 后回调至ｐＨ值中性，用流动相定容，分别进样测 １．２＿３稳定性考察溶液的制备 对照品溶液的制备：移取１．２．２．２项下的储备液 ５．０ ｍＬ至２５．０ ｍＬ棕色量瓶中，加流动相Ａ稀释至 刻度，摇匀；分别移取４．０、６．０、８．０ ｍＬ至２５ ｍＬ 棕色量瓶中，加流动相Ａ稀释至刻度，摇匀，即得。 供试品溶液的制备：取０．５ ｍＬ脂肪乳注射液置 定。色谱图见图１。 １０∞ ９ｏＯ ８ｏＯ ７０Ｏ ５ ｍＬ棕色量瓶中，加流动相稀释至刻度，摇匀；移 取上述液２ ｍＬ置２５ ｍＬ棕色量瓶中，加流动相稀 释至刻度，摇匀；移取上述液４ ｍＬ置１０ ｍＬ棕色 量瓶中，加流动相稀释至刻度，摇匀，即得。 分别精密量取对照品溶液和供试品溶液各 时间（ｍｉｎｌ ’０ ２。 ８００ 主５０。 童砻４００ ３００ ２０Ｏ ｔｏＯ ０ 。 ２０ 注入液相色谱仪，记录色谱图，以ｌ ｇｃ为横 图１大豆油专属性试验色谱图 Ｆｉｇ．１ Ｓｐｅｃｉｆｉｃｉｔｙ ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｍｓ ｏｆ ｓｏｙｂｅａｎ ｏｉｌ ｆｏｒ ｓｐｅｆｉｃｉｙ ｔｔｅｓｔ 坐标，ｌ 为纵坐标，按外标回归曲线法计算脂肪 乳注射液中大豆油的含量。 １．２．４影响因素试验 取本品（Ｆ１１０５２００１．１），除去外包装，于 ４５００Ｌｘ ４－５００Ｌｘ光照度下、４Ｏ℃，６Ｏ℃条件下各放 置５、１０ ｄ，进行强光照射试验和高温试验，取样 测定外观并且按“１．２－３”项下方法测定大豆油标 示量的百分含量，结果与０月相比较。结果见表１。 结果表明：脂肪乳中的大豆油在此色谱条件下经 各种破坏后，均能与各杂质进行良好分离，能进行大 豆油的含量测定，本色谱条件具有一定的专属性。 １．２．２．２线性范围 取大豆油对照品约２５ ｍｇ，精密称定，置５０ｍＬ 井冈山大学学报（自然科学版） ９５ 试验结果表明：本品经４５００Ｌｘ ４－５００Ｌｘ光照 因此未做含量测定。高温对本品大豆油的含量影响 １０ ｄ，脂肪乳注射液ｏ／ｗ的乳状结构和大豆油的标 较大。 示量百分含量没有明显改变，故大豆油对光照相对 １．２．５加速试验 稳定；本品在高温４０℃条件下，ｏ／ｗ的乳状结构和 取本品按上市包装，于３Ｏ℃放置１、２、３、６ 大豆油的标示量的百分含量没有明显改变，故大豆 个月，取样测定外观性状和大豆油标示量的百分含 油在４０℃相对稳定；本品在高温６０℃放置５ ｄ，大 量，结果与０月相比较。结果见表２。 豆油含量降低，１０ ｄ，本品泛黄，呈水样，破乳状， 表２ 加速考察稳定性结果（ ＝２） Ｔ｛ １ｅ ２ Ｒｅｓｕｌｔｓ ｏｆ ａｃｃｅｌｅｒａｔｅｄ ｔｅｓｔｓ １．２．６长期放样考察 放置３、６个月，取样测定外观性状和大豆油标示 将本品按上市包装，于２５℃４－２℃条件下分别 量的百分含量。结果与０月比较，结果见表３。 表３ 长期留样考察稳定性结果（，ｌ＝２） Ｔａｂｌｅ ３ Ｒｅｓｕｌｔｓ ｏｆ ｌｏｎｇ－ｔｅｒｍ ｔｅｓｔ 井冈山大学学报（自然科学版） 在加速试验考察和长期放样考察中，三批样品 性状外观也没有发生太大变化，主成分大豆油的检 测结果与０月标示量的百分含量相比较，均有不同 程度的下降，但都符合脂肪乳注射液部颁标准［７】 ９５．０％～１０５．０％的规定。加速试验３月和６月的三批 样品的大豆油含量，均比长期留样考察检测结果 低，表明温度升高对本样品的贮存有一定影响，本 品对温度较为敏感。 ２讨论 ２．１影响因素的确定 由于本品为密封包装，故未进行湿度影响因素 试验。由于影响因素试验６０￣Ｃ放置５天本品变黄、 呈破乳状，且４０￣Ｃ放置１Ｏ天的大豆油的含量降低 较快，因此本品对温度敏感，加速试验于３０￣Ｃ进行。 ２．２ ＥＬＳＤ测定物质的含量 一般采用外标两点法［８］测定，本研究的稳定性 试验参照脂肪乳注射液部颁标准中大豆油的含量 测定方法配制工作曲线，即配置３份不同浓度的大 豆油对照品，以浓度和峰面积的对数计算回归方 程。ＥＬＳＤ的响应值与供试品溶液的浓度通常呈指 数关系，一般采用ｌ ｇＡ＝ａｌｇＣ＋ｂ（Ａ为响应值，Ｃ 为样品的浓度，ａ、ｂ为常数）的数学模型，高青等［９】 采用线性方程Ａ＝ａＣ＋ｂ的数学模型对单糖进行了 含量测定。为比较两种模型的差异，本研究后期 采用线性方程Ａ：ａＣ＋ｂ的数学模型对试验数据 进行解析，结果各工作曲线的，｜值也均达到０．９９９， 其大豆油含量的测定值略低于对数解析的结果，但 无显著性差异。 参考文献： ［１】 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