昆明医科大学学报２０１２，（７）：４１—４４ ＣＮ ５３—１０４９／Ｒ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｋｕｎｍｉｎｇ Ｍｅｄｉｃａｌ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ 甲状腺激素对大鼠急性肝衰竭肠粘膜屏障功能影响的实验研究 郭峰”，胡敏 ，何建平 ，顾玲 ，储平坤 （１）昆明医科大学临床技能中心，云南昆明 ６５００３１；２）昆明学院医学院，云南昆明 ６５０２１４；３）昆 明医科大学第一附属医院肝胆外科，云南昆明 ６５００３１；４）昆明市呈贡区人民医院普外科， 云南呈贡６５０５００） ［摘要］日的探讨急性肝衰竭（ａｃｕｔｅ ｈｅｐａｔｉｃ ｆａｉｌｕｒｅ，ＡＨＦ）时肠粘膜屏障功能损害及甲状腺激素（ｔｈｙｒｏｉｄ ｈｏｒｍｏｎｅ，ＴＨ）代谢异常，补充外源性甲状腺激素对损害的肠粘膜屏障的影响．方法ＳＤ大鼠３４只，随机分为３ 组：正常对照组（ｓｏ组）、急性肝衰竭组（ＡＨＦ组）和治疗组（ＡＨＦ＋ＴＨ组）．腹腔内注射硫代乙酰胺（ｔｈｉｏａｃ— ｅｔａｍｉｄｅ，ＴＡＡ）模拟建立ＡＨＦ模型．按１５￣ｇ／ｋｇ的标准腹腔注射ＴＨ，取下腔静脉血检测ＴＨ水平及肝功能指标， 取门静脉血测内毒素水平，取肝脏行普通ＨＥ染色观察，并使用图像分析系统测量小肠绒毛长度．结果ＡＨＦ＋ ＴＨ组肝功能较ＡＨＦ组有改善（Ｐ＜０．０５），内毒素水平有所降低，小肠绒毛长度有所升高（Ｐ＜０．０５）．结论补 充外源性ＴＨ在ＡＨＦ时有一定的保护肝脏功能和减轻损伤、保护肠粘膜屏障的作用． ［关键词］急性肝衰；肠粘膜屏障；甲状腺激素 ［中图分类号］Ｒ７３５．７［文献标识码］Ａ［文章编号］１００３—４７０６（２０１２）０７—００４１—０４ Ｔｈｅ Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ Ｅｆｆｃｔ ｏｆ Ｔｈｙｒｏｉｄ Ｈｏｒｍｏｎｅ ｏｎ Ｆｕｎｃｔｉｏｎ ｏｆ Ｉｎｔｅｓｔｉｎａｌ Ｍｕｃｏｓａ Ｂａｒｒｉｅｒ ｉｎ Ｒａｔｓ ｗｉｔｈ Ａｃｕｔｅ Ｈｅｐａｔｉｃ Ｆａｉｌｕｒｅ ＧＵＯ Ｆｅｎｇ”，ＨＵ Ｍｉｎ ，ＨＥ Ｊｉａｎ—ｐｉｎｇ ，ＹＡＮＧ Ｆｕ ，ＣＨＵ Ｐｉｎｇ—ｋｕｎ （１）Ｃｌｉｎｉｃａｌ Ｓｋｉｌｌ Ｔｒａｉｎｉｎｇ Ｃｅｎｔｅｒ ｏｆＫｕｎｍｉｎｇ Ｍｅｄｉｃａｌ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｋｕｎｍｉｎｇ Ｙｕｎｎａｎ ６５００３１；２）Ｍｅｄｉｃａｌ Ｃｏｌｌｅｇｅ ｏｆＫｕｎｍｉｎｇ Ｃｏｌｌｅｇｅ，Ｋｕｎｍｉｎｇ Ｙｕｎｎａｎ ６５０２１４；３）Ｄｅｐｔ．ｏｆＨｅｐａｔｏｂｉｌｉａｒｙ Ｓｕｒｇｅｒｙ，ｏｆＫｕｎｍｉｎｇ Ｍｅｄｉｃａｌ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｋｕｎｍｉｎｇ Ｙｕｎｎａｎ ６５００３２；４）Ｄｅｐｔ．ｏｆ Ｇｅｎｅｒａｌ Ｓｕｒｇｅｒｙ，Ｃｈｅｎｇｇｏｎｇ Ｄｉｓｔｒｉｃｔ Ｐｅｏｐｌｅ’ｓ Ｈｏｓｐ ｉｔｌａ，Ｋｕｎｍｉｎｇ Ｙｕｎｎａｎ ６５０５００，Ｃｈｉｎａ） Ｉ Ａｂｓｔｒａｃｔ ｌ Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ Ｔｏ ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｅ ｔｈｅ ｉｎｊｕｒｙ ｏｆ ｉｎｔｅｓｔｉｎａｌ ｍｕｅｏｓａ ｂａｒｒｉｅｒ，ｔｈｅ ｍｅｔａｂｏｌｉｃ ａｂｎｏｒｍａｌｉｔｉｅｓ ｏｆ ｔｈｙｒｏｉｄ ｈｏｒｍｏｎｅ．ａｎｄ ｔｈｅ ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ ｅｆｆｅｃｔ ｏｆ ｅｘｏｇｅｎｏｕｓ ｔｈｙｒｏｉｄ ｈｏｒｍｏｎｅ ｏｎ ｉｎｔｅｓｔｉｎａｌ ｍｕｅｏｓａ ｂａｒｒｉｅｒ ｉｎ ｒａｔｓ ｗｉｔｈ ａｃｕｔｅ ｈｅｐａｔｉｃ ｆａｉｌｕｒｅ．Ｍｅｔｈｏｄｓ ３６ ＳＤ ｒａｔｓ ｗｅｒｅ ｒａｎｄｏｍｌｙ ｄｉｖｉｄｅｄ ｉｎｔｏ ３ ｇｒｏｕｐｓ：ｃｏｎｔｒｏｌ ｇｒｏｕｐ（ＳＯ ｇｒｏｕｐ）， ａｃｕｔｅ ｌｉｖｅ ｆａｉｌｕｒｅ ｇｒｏｕｐ（ＡＨＦ ｒｇｏｕｐ）ａｎｄ ｔｒｅａｔｍｅｎｔ ｇｒｏｕｐ（ＡＨＦ＋ＴＨ ｒｇｏｕｐ）．Ｔｈｅ ＡＨＦ Ｒａｔ ｍｏｄｅｌ ｗａｓ ｅｓｔａｂｌｉｓｈｅｄ ｂｙ ｒｅｐｅａｔｅｄ ｉｎｊｅｃｔｉｏｎ ｏｆ ｔｈｉｏａｃｅｔａｍｉｄｅ（ＴＡＡ）．ＴＨ ｗａｓ ａｄｍｉｎｉｓｔｅｒｅｄ ｉｎｔｒａｐｅｒｉｔｏｎｅａｌｌｙ ｔｏ ｃｏｒｒｅｃｔ ｔｈｅ ｌＯＷ ＴＨ ｓｙｎｄｒｏｍｅ ｏｆ ＡＨＦ ｒａｔｓ．Ｔｈｅ ｂｌｏｏｄ ｉｎ ｉｎｆｅｒｉｏｒ ｖｅｎａ ｃａｖａ ｗａｓ ｃｏｌｌｅｃｔｅｄ ｔｏ ｄｅｔｅｃｔ ｔｈｅ ｌｅｖｅｌ ｏｆ ｔｈｙｒｏｉｄ ｈｏｒｍｏｎｅ ａｎｄ ｌｉｖｅｒ ｆｕｎｃｔｉｏｎ。ｔｈｅ ｂｌｏｏｄ ｉｎ ｐｏｒｔａｌ ｖｅｉｎ ｗａｓ ｃｏｌｌｅｃｔｅｄ ｔｏ ｄｅｔｅｃｔ ｔｈｅ ｌｅｖｅｌ ｏｆ ｅｎｄｏｔｏｘｉｎ，ａｎｄ ｔｈｅ ｌｉｖｅｒ ｗａｓ ｓａｍｐｌｅｄ ｔｏ ｏｂｓｅｒｖｅ ｔｈｅ ｐａｔｈｏｌｏｇｉｃａｌ ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ ｂｙ ＨＥ ｓｔａｉｎｉｎｇ．ｔｈｅ ｌｅｎｇｔｈ ｏｆ ｉｎｔｅｓｔｉｎａｌ ｖｉｌｌｉ ｗａｓ ｄｅｔｅｒｍｉｎｅｄ ｂｙ ｉｍａｇｅ ａｎａｌｙｓｉｓ ｓｙｓｔｅｍ． Ｒｅｓｕｌｔｓ Ｃｏｍｐａｒｅｄ ｗｉｔｈ ＡＨＦ ｇｒｏｕｐ．ｔｈｅ ｌｉｖｅｒ ｆｕｎｃｔｉｏｎ ｏｆ ｒａｔｓ ｉｎ ＡＨＦ＋ＴＨ ｇｒｏｕｐ ｗａｓ ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙ ｉｍｐｒｏｖｅｄ（Ｐ＜ ０．０５）．ｔｈｅ ｂｌｏｏｄ ｌｅｖｅｌｓ ｏｆ ｅｎｄｏｔｏｘｉｎ ｗｅｒｅ ｄｅｃｒｅａｓｅｄ ａｎｄ ｔｈｅ ｌｅｎｇｔｈ ｏｆ ｉｎｔｅｓｔｉｎａｌ ｖｉｌｌｉ ｗａｓ ｅｘｔｅｎｄｅｄ（Ｐ＜０．０５）． Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ Ｔｈｅ ｓｕｐｐｌｅｍｅｎｔ ｏｆ ｅｘｏｇｅｎｏｕｓ ｔｈｙｒｏｉｄ ｈｏｒｍｏｎｅ ｃａｎ ｐｒｏｔｅｃｔ ｉｎｔｅｓｔｉｎａｌ ｍｕｃｏｓａ ｂａｒｒｉｅｒ ａｎｄ ｔｈｅ ｆｕｎｃｔｉｏｎ ｏｆ ｌｉｖｅｒ．ａｎｄ ａｌｌｅｖｉａｔｅ ｔｈｅ ｉｎｊｕｒｅ ｏｆ ｉｎｔｅｓｔｉｎａｌ ｍｕｃｏｓａ ｂａｒｒｉｅｒ ｉｎ ｒａｔｓ ｗｉｔｈ ａｃｕｔｅ ｈｅｐａｔｉｃ ｆａｉｌｕｒｅ． １ Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ ｌ Ａｃｕｔｅ ｈｅｐａｔｉｃ ｆａｉｌｕｒｅ；Ｉｎｔｅｓｔｉｎａｌ ｍｕｃｏｓａ ｂａｒｒｉｅｒ；Ｔｈｙｒｏｉｄ ｈｏｒｍｏｎｅ ［基金项目］ 国家自然科学基金资助项目（８１０６０３６１）；云南省应用基础研究基金资助项目（２０１０ｚｃ１６９） ［作者简介］ 郭峰（１９８３～），男，辽宁朝阳市人，医学硕士，助教，主要从事外科临床基础的教学与科研工作．胡敏 和郭峰对本文有同等贡献 ［通讯作者］ 储平坤．Ｅ－ｍａｉｈｇｕｏｆｅｎｇ２００１３０８８＠１６３．ｅｏｍ；何建平．Ｅ－ｍａｉｈＩ ２０１２７８５５＠ｑｑ．ｃｏｒｎ ４２ 昆明医科大学学报 第３３卷 外科应激下肠道屏障作用出现异常并伴有一定 １．２统计学处理 程度甲状腺病态综合征的现象日益引起学界的广泛 所得数据采用ＳＰＳＳ统计软件包分析，计量资 关注，笔者以硫代乙酰胺诱导大鼠发生急性肝衰 料采用方差分析，方差不齐采用秩和检验．计数 竭，观察应激状态下补充外源性甲状腺激素人为纠 资料采用ｘ 检验，Ｐ＜０．０为差异有统计学意义． 正甲状腺病态综合征对大鼠急性肝衰竭时肝功能和 肠粘膜屏障的影响，现报道如下． ２结果 １材料与方法 ２．１一般情况 ＳＯ组动物无不良状况出现．ＡＨＦ组出现不同 １．１分组与动物模型 程度的精神萎靡，活动减少，进食减少，腹部高 健康清洁ＳＤ大白鼠３４只，体重约２２０～２５０ 度膨隆（中毒性鼓肠）等．ＡＨＦ＋ＴＨ组动物较 ｇ，雌雄不限，由昆明医科大学动物科提供．随机 ＡＨＦ组稍有减轻．各组死亡及中毒性鼓肠情况见 分为３组：正常组（ｓｈａｍ ｏｐｅｒａｔｉｏｎ，ＳＯ组）ｎ＝ 表１ １０；急性肝衰竭组（ａｃｕｔｅ ｈｅｐａｔｉｃ ｆａｉｌｕｒｅ，ＡＨＦ组） 肝功变化见表２．ＤＦＭ一９６型多管放射免疫计 ｎ＝１２；治疗组（Ｔｈｙｒｏｉｄ ｈｏｒｍｏｎｅ ｔｒｅａｔｍｅｎｔ ｏｆ ａｃｕｔｅ 数器测定甲状腺素结果见表３．偶氮显色法测门静 ｈｅｐａｔｉｃ ｆａｉｌｕｒｅ，ＡＨＦ＋ＴＨ组）ｎ＝１２．ＳＯ组未予任 脉血浆内毒素水平，见表４． 何人为干预．根据ＡＨＦ的诊断标准『１．２】以注射ＴＡＡ 方法模拟建立ＡＨＦ大鼠模型，具体方法详见文献 表１各组实验大鼠死亡及中毒性鼓肠情况 ｌ３Ｊ．每次注射ＴＡＡ后腹腔注射生理盐水２ ｍＬ，于 Ｔａｂ．１ Ｔｈｅ ｄｅａｔｈ ａｎｄ ｉｎｔｅｓｔｉｎａｌ ｍｅｔｅｏｒｉｓｍ ｒａｔｅ ｏｆ 首次腹腔注射ＴＡＡ始４８ ｈ宰杀存活的大鼠． ｒａｔｓｉｎ ｅａｃｈｇｒｏｕｐ ＡＨＦ＋ＴＨ组另需造模前３０ ｍｉｎ、首次腹腔注射 ＴＡＡ后１８ ｈ、３６ ｈ，分别按１５ ｋｇ的标准对腹腔 注射甲状腺激素，共３次．麻醉，固定，无菌条件 下开腹取材，开腹前１２ ｈ禁食，自由饮水． 表２各组大鼠肝功能检测结果 ±ｓ） Ｔａｂ．２ ＴｈｅＨｖｅｒｆｕｎｃｔｉｏｎｔｅｓｔｒｅｓｕｌｔ ±ｓ） 与ｓ０组相比， Ｐ＜０．０１；与ＡＨＦ组比较， Ｐ＜Ｏ．０５ 表３血清甲状腺素测定结果 ±Ｓ） Ｔａｂ．３ Ｔｈｅ ｓｅｒｕｍ ｌｅｖｅｌｓ ｏｆｔｈｙｒｏｘｉｎｅ ±ｓ） 与Ｓ０组相比， Ｐ＜Ｏ．０１；与ＡＨＦ组比较， Ｐ＜０．０１；与ＡＨＦ组比较，＃Ｐ＜０．０５ ２．２光镜下肝脏组织病理学变化结果 脂肪样变性．可见肝细胞核碎裂，炎性细胞明显浸 ＳＯ组肝细胞形态正常，胞浆丰富（见图１图 润，肝ｚＪ，ｚ￣－尚清晰，肝索排列不整齐（见图３图 ２）．ＡＨＦ组大鼠肝组织呈片状坏死，肝细胞高度 ４）．ＡＨＦ＋ＴＨ组大鼠肝脏病理改变较急性肝功能衰 肿胀，体积变大，部分细胞空泡变性，或见肝细胞 竭组均有所减轻，肝细胞坏死面积减少，仍有炎性 昆明医科大学学报 第３３卷 ３讨论 目前普遍认为肠道是外科应激反应的中心器 官，许多外科疾病，均可削弱肠道屏障功能，引 起细菌／内毒素移位，使之成为全身炎症反应的细 菌来源，最终触发多脏器功能衰竭［４１．尤其是肠源 性内毒素血症（ＩＥＴＭ）与肝病的关系日益受到重 视，二者互为因果，从而对肝病的发生发展产生 重要影响嘲．特别是内毒素作用于肝脏后，引起多 种细胞因子的分泌和释放，可导致肝内微循环障 碍，肝损害的进一步加重，甚至出现黄疸、出血、 肾功能衰竭与肝性脑病等肝功能衰竭临床综合 征．ＴＨ是维持机体生长、发育与代谢功能的重要 激素，具有多种的生物学效应．ＴＨ经血循环作用 于全身多种组织细胞，主要是促进细胞的物质和 能量代谢，以及与代谢有关的生长和发育过程嘲， 提示补充外源性ＴＨ纠正低ＦＴ３状态可能具有改善 代谢和保护脏器的功能．近年的研究表明，补充 外源性ＴＨ对外科重症时的器官有保护作用，这已 在心、肺、器官移植中得到初步证实嗍．但甲状 腺激素对肠屏障是否具有保护作用尚少见报道． 本实验采用建立大鼠ＡＨＦ模型，显示ＡＨＦ时 大鼠发生了正常甲状腺的病态综合症（ｅｕｔｈｙｒｏｉｄ ｓｉｃｋ ｓｙｎｄｒｏｍｅ，ＥＳＳ）１９］．通过腹腔注射ＴＨ可以基 本纠正这些大鼠所发生的ＥＳＳ．通过相关检测指标 观察到ＡＨＦ组肠粘膜机械性屏障明显受损， ＡＨＦ＋ＴＨ组肠粘膜屏障受损的程度明显减轻．结 果提示甲状腺激素对ＡＨＦ时肠粘膜屏障具有明显 的保护作用．此外，笔者还观察到ＡＨＦ＋ＴＨ组大 鼠脓毒症表现较ＡＨＦ组明显减轻，肝功能有所改 善．以上实验结果提示，适时补充外源性甲状腺 激素可以改善ＡＨＦ时肝功能，延缓恶化，减轻了 肠粘膜机械性屏障的损伤和肠源性内毒素血症， 预防或减缓ＭＯＤＳ的发生，从而改善预后．其对 临床在重症的治疗上有一定应用价值，且因为其 价格便宜在未来的实际应用中有很大的优势． ［参考文献］ ［１］ 中华医学会感染病学分会肝衰竭与人工肝学组．肝衰竭 诊疗指南［Ｊ］．中华肝脏病杂志，２００６，１４（９）：６４３— ６４６． １ ２ Ｊ ＰＯＬＳＯＮ Ｊ，ＬＥＥ Ｗ Ｍ．ＡＡＳＬＤ ｐｏｓｉｔｉｏｎ ｐａｐｅｒ：ｔｈｅ ｍａｎａｇ－ ｅｍｅｎｔ ｏｆａｃｕｔｅ ｈｖｅｒｆａｉｌｕｒｅ［Ｊ］．Ｈｅｐａｔｏｌ，２００５，４１（５）：１ １７９—１ １９７． ［３］ＺＩＭＭＥＲＭＡＮＮ Ｃ，ＰＥＴＥＲ Ｆ，ＣＨＲＩＳＴＩＡＮ Ｐ，ｅｔ ａ１．Ｈｅｐ— ａｔｉｃ ｅｎｃｅｐｈａｌｏｐａｔｈｙ ｉｎ ｔｈｉｏａｅｅｔａｍｉｄｅ ｉｎｄｕｃｅｄ ａｃｕｔｅ ｌｉｖｅｒ ｆａｉｌｕｒｅ ｉｎ ｒａｔ：ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚａｔｉｏｎ ｏｆ ｉｍｐｒｏｖｅｄ ｍｏｄｅｌ ａｎｄ ｓｔｕｄｙ ｏｆ ａｍｉｎｏ ａｅｉｄｅｒｇｉｃ ｎｅｕｒｏｔｒａｎｓｍｉｓｓｉｏｎ［Ｊ］ １９８９，９（４）：５９４． ［４］金德，刘军桂．甲状腺素对肠缺血一再灌注肠粘膜屏障 功能的保护作用［Ｊ］． 中国临床医学，２００６，１３（４）： ６０６－－６０７． ［５］朱旭阳，戴昌华，王丹凤，等．甲状腺素对重症急性胰 腺炎肠黏膜屏障功能的保护作用［Ｊ］．实用临床医药 杂志，２０１０，１４（９）：１０２—１０３． ［６］石慧琳． 应激对肠道屏障功能影响的研究进展［Ｊ］． 国外医学（消化系疾病分册），２００３，２３（３）：１６４—１６７． ［７］ＣＨＩＥＶＥＬＥＹ—ＷＩＬＬＩＭＡＳ，ＨＡＭＩＬＴＯＮ—ＤＶＡＩＥＳ Ｃ．Ｔｈｅ ｒｏｌｅ ｏｆ ｔｈｅ ｇｕｔ ｉｎ ｍａｊｏｒ ｓｕｒｇｉｃａｌ ｐｏｓｔ—ｏｐｅｒａｔｉｖｅ ｍｏｒｂｉｄｉｔｙ ｌＪ Ｊ．ＩｎｔＡｎｅｓｔｈｅｓｉｏｌＣｌｉｎ，１９９９，３７（２）：８１—１１０． ［８］叶任高，陆再英．内科学［Ｍ］．第６版．北京：人民卫生 出版社，２００４：７３０—７３１． ［９］杨连粤，黄耿文．外科危重病人正常甲状腺病态综合 征的研究进展［Ｊｊ．中华实验外科杂志，２０００，２０２：１１４— １１８． （２０１２－－０３—１０收稿）